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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Chalcone Isomerase (CHI) Kit
- CAS号:
WS7001F
- 保质期:
3个月
- 供应商:
上海瓦兰生物
- 保存条件:
4℃
- 规格:
48T
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文献和实验℃,而拓扑异构酶I则偏爱室温。这个室温是指22-23℃,应特别注意。很多时候我们实验室的室内温度并不满足条件。TOPO克隆得到的菌落可能不如TA克隆多,不过质量高,95%左右都是重组子。价格约为5748元/20次,时间就是金钱,这下体会到了吧。 如果你用的是高保真酶,你可以选择在PCR之后加A,或者你直接选择平端克隆试剂盒。由于载体会自连,所以平末端克隆的背景会很高。为了避免这个问题,Invitrogen开发了Zero Background(零背景)技术,用在TOPO载体上。这个技术
最近在做质粒提取方面的实验,搜集了相关资料与大家分享,这是传统提质粒的方法,与试剂盒提质粒不同,通过这个过程大家可以更好的明白实验原理。 1.目的 学会最常用的小量制备质粒DNA的碱裂解方法。 2.原理 根据共价闭合环状质粒DNA与线性DNA在拓扑学上的差异来分离。在pH12.0~12.5这个狭窄的范围内,线性DNA双螺旋结构解开而被变性。尽管在这项的条件下共价闭合环状质粒DNA也会变性,但两条互补链彼此互相盘绕,仍会紧密结合在一起。当加入pH4.8的乙酸钾高盐缓冲液使pH恢复中性时
目前市场上常见的TA克隆试剂盒,根据连接方法可以分成两种:方法1:以T4连接酶进行连接的方法,这两种方法转化子比较多,阳性率也不错,唯一的不足就是连接的时间长。因为连接时间越长效率越高,一般快速连接方法需要半个小时到一个小时;达到最佳的效果,要过夜连接。方法2:以拓扑异构酶(TOPO)进行连接的方法,这种方法的优势是快速连接,在5-15分钟就可以将目的基因克隆到载体中,阳性率比较高,这种方法国内也有人模仿。这种方法虽然速度快,但是也有一些缺陷,比如长片段连接效率不如T4连接酶,转化子少










