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查尔酮异构酶(CHI)试剂盒

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  • ¥900
  • wksubio
  • WS7001F
  • 国内
  • 2026年01月03日
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    • 英文名

      Chalcone Isomerase (CHI) Kit

    • CAS号

      WS7001F

    • 保质期

      3个月

    • 供应商

      上海瓦兰生物

    • 保存条件

      4℃

    • 规格

      48T

    本试剂盒仅供科研使用
    查尔酮异构酶(chalcone isomerase,CHI)试剂盒说明书
    WS7001F 分光法 48 样)
    一、产品简介:
    查尔酮异构酶(CHI, EC 5.5.1.6)是第一个被认识的黄酮类化合物合成相关酶,也是黄
    酮代谢途径中的关键酶之一。广泛存在于多种植物中,在植物的抗菌机制、抗胁迫、细
    胞的发育和分化、色素的积累和外源基因的表达等方面起着重要的作用。
    查尔酮异构酶(CHI)可使查尔酮形成二氢黄酮,通过检测查尔酮的初始降解速率进而
    得出查尔酮异构酶的酶活性大小。
    二、试剂盒组分与配制:
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    提取液
    液体 60mL×1
    4℃保存
    试剂一
    液体 30mL×1
    4℃保存
    试剂二
    粉体×2
    4℃保存
    临用前离心或甩几下使试剂落
    入底部,每支再分别加 1.2mL
    乙醇充分溶解,4℃保存。
    三、所需的仪器和用品:
    紫外分光光度计、1mL 石英比色皿(光径 1cm)、台式离心机、可调式移液器、研钵、
    冰和蒸馏水。
    四、查尔酮异构酶(CHI)活性测定:
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
    样本和试剂浪费!
    1、样本制备:
    称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液,进行冰浴匀浆。12000rpm 4℃离心 15min,取上
    清,置冰上待测。
    【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例提取
    2、上机检测:
    ① 紫外分光光度计预热 30min 以上,温度设定 30℃,调节波长至 380nm,蒸馏水调零。
    ② 试剂放在 30℃水浴 5min
    ③ 按照下表在 1mL 石英比色皿(光径 1cm)中依次加入试剂:
    试剂名称(μL
    测定管
    样本
    160
    试剂一
    600
    试剂二
    40
    混匀,30℃条件下,立即于 380nm
    读取吸光值 A110min 后读取 A2
    【注】:若ΔA 在零附近徘徊,可延长反应时间 T(如:30min 或更长),
    或加大样本量 V1(如增至 240μL,则试剂一相应减少),重新
    调整后的反应时间 T V1 需代入计算公式重新计算。
    五、结果计算:
    1、按样本蛋白浓度计算:
    酶活单位定义:每毫克组织蛋白每分钟吸光值变化 0.005 为一个酶活单位(U)。本试剂盒仅供科研使用
    2
    CHIU/min/mg prot)=(ΔA÷0.005)÷(V1×Cpr) ÷T=125×ΔA÷Cpr
    2、按样本鲜重计算:
    酶活单位定义:每克样本每分钟吸光值变化 0.01 为一个酶活单位(U)。
    CHIU/min/g 鲜重)=(ΔA÷0.005)÷(W×V1÷V) ÷T=125×ΔA÷W
    V---加入提取液体积,1 mL
    V1---加入样本体积,0.16 mL
    T---反应时间,10 min
    W---样本质量,g
    Cpr---样本蛋白质浓度,mg/mL,建议使用本公司的 BCA 蛋白含量测定试剂盒;

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