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- wksubio
- WS4001F
- 国内
- 2025年12月12日
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- 详细信息
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Manganese Peroxidase (Mnp) Kit
- CAS号：
WS4001F
- 保质期：
3个月
- 供应商：
上海瓦兰生物
- 保存条件：
4℃
- 规格：
48T
本试剂盒仅供科研使用
锰过氧化物酶（Manganese peroxidase，Mnp）试剂盒说明书
（货号：WS4001F 分光法 48 样）
一、产品简介：
锰过氧化物酶（EC1.11.1.13，Mnp）是真菌分泌的一种糖基化的胞外蛋白，含亚铁血红
素的过氧化物酶，主要存在于引起白腐的木腐菌和土壤枯草菌这两个担子真菌中，属于木
质素降解酶系，能有效的降解木质素及废水和环境中其他一些抗性物质，如腐殖质酸和包
括多环芳烃在内的多种有机污染物等。
锰过氧化物酶（Mnp）在 Mn2+存在的条件下，将二甲氧基*酚（DMP）氧化生成的产物
在 470nm 处有特征吸收峰。通过检测该产物在 470nm 处的增加速率，即可得到 Mnp 酶活
性大小。
二、试剂盒组分与配制：
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体 60mL×1 瓶
4℃保存
试剂一
液体 30mL×1 瓶
4℃保存
试剂二
粉剂×1 瓶
4℃保存
用前甩几下使粉剂落入底部，再加
5mL 无水乙醇溶解备用。
试剂三
粉剂×1 瓶
4℃保存
用前甩几下使粉剂落入底部，再加
3mL 蒸馏水充分溶解备用。
试剂四
液体×1 支
4℃保存
用前甩几下使液体落入底部，取出
3µL 液体至新的 EP 管中，再加
1.5mL 蒸馏水混匀备用。
三、所需的仪器和用品：
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、天平、低温离心机、研钵、冰和蒸馏水。
四、锰过氧化物酶（ Mnp)活性测定：
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、样本制备：
① 组织样本：
取约 0.1g 组织（水分充足的样本可取 0.5g），加入 1mL 提取液，进行冰浴匀浆。
4℃×12000rpm 离心 10min，取上清，置冰上待测。
【注】：若增加样本量，可按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取
② 细菌或培养细胞：
先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取
液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；
4℃×12000rpm 离心 10min，取上清，置冰上待测。
【注】：若增加样本量，可按照数量（104）：提取液体积(mL)为 500-1000：1 的比例进行提取
③ 液体样本：若是澄清液体，直接检测，若液体样本浑浊，需 4℃×12000rpm，离心
10min，取上清液检测。
2、上机检测：
1 可见分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 470nm，蒸馏水调零。
2 所有试剂至常温状态（25℃）。
3 在 1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）中依次加入：本试剂盒仅供科研使用
2
试剂名称（µL）
测定管
样本
80
试剂一
580
试剂二
80
试剂三
40
试剂四
20
混匀，30℃条件下反应，10s 时读取
A1，10min 后读取 A2，△A=A2-A1。
【注】若△A 在零附近徘徊，可增加样本量（如增至 40µL，则试剂一相应减少），或延长反应
时间 T 至 15min 或更长，则改变后的样本 V1 和反应时间 T 需代入公司重新计算。
五、结果计算：
1．按照蛋白浓度计算：
酶活定义：每毫克蛋白每分钟氧化 1nmol 的 DMP 所需酶量为一个酶活力单位。
MnP 活性(nmol/min/mg prot)=[△A÷(ε×d)×V2×109]÷(V1×Cpr)÷T=18.2×△A÷Cpr
2．按照样本质量计算：
酶活定义：每克样品每分钟氧化 1nmol 的 DMP 所需酶量为一个酶活力单位。
MnP 活性(nmol/min/g 鲜重)=[△A÷(ε×d)×V2×109]÷(W×V1÷V)÷T=18.2×△A÷W
3．按照细胞数量计算：
酶活定义：每 104个细胞每分钟氧化 1nmol 的 DMP 所需酶量为一个酶活力单位。
MnP 活性(nmol/min/104 cell)=[△A÷(ε×d)×V2×109]÷(细胞数量×V1÷V)÷T
=18.2×ΔA÷细胞数量
4．按照液体体积计算：
酶活定义：每毫升液体每分钟氧化 1nmol 的 DMP 所需酶量为一个酶活力单位。
MnP 活性(nmol/min/mL)=[△A÷(ε×d)×V2×109]÷V1÷T=18.2×ΔA
ε---DMP 被氧化的产物的摩尔消光系数：55000L/mol/cm；
d---光径，1cm；
V---加入提取液体积，1mL；
V1---反应中样本体积，0.08mL；
V2---反应总体积，8×10-4 L；
W---样本质量，g；
T---反应时间，10min；
Cpr---样本蛋白浓度，mg/mL；建议使用本公司的 BCA 蛋白含量检测试剂盒。
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锰过氧化物酶(Mnp)试剂盒
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