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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
52
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 通用型禽流感病毒RT-PCR检测试剂盒 | 50T | LZ-P1820 |
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,引物和探针经过优化,灵敏性高,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标DNA高度保守区设计,不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应,既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级,本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取:核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
3.1如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板)。
| 786-O(人肾透明细胞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 | ANKRD5: 锚蛋白重复域5抗体 0.2ml |
| 雪旺细胞培养基SCM-prf | Rhesus antibody Rh C9ORF46 9号染色体开放阅读框46抗体 规格 0.2ml |
| GHR Others Mouse 小鼠 GHR 人细胞裂解液 (阳性对照) | 5-LO/LOX(Human 5-lipoxygenase) ELISA Kit 人5脂加氧酶 96T |
| EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0906 人内脏脂肪细胞完全培养基 100mL | Anti-p44/42 MAPK (phospho Thr202/Tyr204) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠0酸化原活化蛋白激酶1/2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| THP-1人单核白血病细胞 Human | Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr740): 0酸化血小板源性生长因子受体-B抗体 0.1ml |
| 正常大鼠肾细胞;NRK-52E | Anti-ECM1/FITC 荧光素标记细胞外基质蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| Rhesus antibody Rh phospho-EPH A3+A4+A5 ( Tyr779) 0酸化内皮细胞受体蛋白酪氨酸激酶A3+A4+A5抗体 规格 0.1ml | FGFR1 peptide 碱性成纤维细胞生长因子受体-1(多肽抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg |
| Rhesus antibody Rh Gibberellins 抗赤霉素抗体 规格 0.1ml | HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
| IL-12R Beta2/IL12RB2 peptide 白细胞介素-12受体β2抗原 0.5mg | CL-0403NCI-H524(人非小细胞肺癌细胞)5×106cells/瓶×2 |
| CDK14: 周期蛋白依赖性激酶14抗体 0.2ml | 人肝实质细胞完全培养基 100mL |
| GPR40: G蛋白偶联受体40抗体 0.2ml | 人小气管上皮细胞(HSAEpiC)(5×105 ) |
| Anti-Phospho-p95/NBS1 (Ser343) 0酸化DNA修复蛋白NBS1抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml | FIGF Protein Mouse 重组小鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 标签) |
| T3(Mouse Tri-iodothyronine)ELISA Kit 小鼠三碘甲状腺原氨酸Multi-class antibodies规格: 48T | 通用型禽流感病毒RT-PCR检测试剂盒FCER1A Others Mouse 小鼠 FcERI / FCER1A 人细胞裂解液 (阳性对照) |
| UBE2D1: 泛素蛋白连接酶D1抗体 0.2ml | MA891瘤 癌 |
| SMC4: 染色体结构维持蛋白4抗体 0.2ml | B16-F10小鼠皮肤黑色素瘤细胞 B16-F10 mouse melanoma cell DMEM培养基+10%FBS |
【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
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文献和实验不过科研人员就没那么好运了,科研中需要用到定量PCR检测的目标广泛,不容易找到带有探针的定量检测试剂盒。当然,针对这种现状,几个大公司陆续推出探针库,比如罗氏的UPL通用探针库,就可以通过组合定量检测出人、大小鼠等7个物种的大部分ORF序列,特别适合大型实验室;ABI公司现在可以根据用户的需要提供约十二万种基因表达引物、探针和两百多万种SNP分析的引物探针进行科学研究,据说是源自于世界各地研究人员要求定制探针或者引物后汇总的结果,可惜就是贵,就连美国的实验室教授
赐教!! lwjssry 要排除死亡受体途径检测一下caspase-8,如果caspase-8没有激活就可以了 月朗渔 谢谢! 我还想问下caspase-8、caspase-9和caspase-3如何检测?在这方面我还是新手,对于各种检测方法还比较陌生,不知道哪种方法更好些? lwjssry 用western或者用活性检测试剂盒。 月朗渔 好的,谢谢!
实验室检测和快速诊断的标准如《GB/T 19438.1-2004禽流感病毒通用荧光RT-PCR检测方法》、《GB/T 19438.2-2004 H5亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法》、《GB/T 19438.3-2004 H7亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法》等。以上实时荧光定量PCR技术在禽流感检测方面的国家标准是该技术在当前的人感染猪流感诊断中应用的基础和前提。实时荧光定量PCR技术及在我国卫生应急中的应用要求实时荧光定量PCR技术(Real-time quantitative
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