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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃±5℃,避光保存
- 保质期:
2年
- 库存:
50
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 规格:
48T
包装规格:48份/盒
储存条件及有效期:-20℃±5℃避光保存,有效期 12 个月。
产品运输:标本运送应采用 2-8℃冰袋运输,严禁反复冻融。
适用仪器:ABI 7300、7500、ABI stepone / stepone plus 、安捷伦 MX3000P/3005P、MJ Opticon2 等其他荧光定量 PCR 检测仪。
结果判断
阳性:检测通道 Ct 值≤35.0,且曲线有明显的指数增长曲线;
可疑:检测通道 35.0<Ct值≤37,建议重复检测,如果检测通道仍为 35.0<Ct值≤37,且曲线有明显的增长曲线,判定为阳性,否则为阴性;
阴性:样本检测结果 Ct 值>37 或无 Ct 值。
质控标准
阴性质控品:无明显扩增曲线或无 Ct 值显示;
阳性质控品:扩增曲线有明显指数生长期,且 Ct 值≤32;
以上条件应同时满足,否则实验视为无效。
购买产品需注意以下事项:
※所有操作严格按照说明书进行;
※试剂盒内各种组分使用前应自然融化,完全混匀并短暂离心;
※反应液应避光保存;
※反应中尽量避免气泡存在,管盖需盖紧;
※使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服;
※样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行,以免交叉污染;
※实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器;
※试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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文献和实验随机引物 适用于长的或具有发卡结构的 RNA。适用于 rRNA、mRNA、tRNA 等所有 RNA 的反转录反应。主要用于单一模板的 RT-PCR 反应。 Oligo dT 适用于具有 PolyA 尾巴的 RNA。(原核生物的 RNA、真核生物的 Oligo dT rRNA 和 tRNA 不具PolyA 尾 巴。)由于 Oligo dT 要结合到 PolyA 尾巴上,所以对 RNA 样品的质量要求较高,即使有少量降解也 会使全长 cDNA 合成量大大减少。 基因特异性引物 与模板序列互补
The RT-PCR kit contains polymerase and all necessary reagents to perform single tube RT and PCR. However, we will break the reaction into two discrete steps, RT (reverse transcription to convert mRNA to cDNA) and PCR
检测或定量。另外,这项技术还可以用来检测基因表达差异或不必构建cDNA文库克隆cDNA。RT-PCR比其他包括Northern印迹、RNase保护分析、原位杂交及S1核酸酶分析在内的RNA分析技术,更灵敏,更易于操作。 RT-PCR的模板可以为总RNA或poly(A)+选择性RNA。逆转录反应可以使用逆转录酶,以随机引物、oligo(dT)或基因特异性的引物(GSP)起始。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在最佳条件下进行。cDNA的合成首先在逆转录缓冲液中进行
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