- ￥1248 - 8580
- 邦景
- BJ-PJ6718
- 国产
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
51
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
500U/5KU
| 规格： | 500U | 产品价格： | ￥1248.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 5KU | 产品价格： | ￥8580.0 |
| 产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
| 牛痘病毒-拓扑异构酶 | BJ-PJ6718 | 500U | 1248 |
| 牛痘病毒-拓扑异构酶 | BJ-PJ6718 | 5KU | 8580 |
描述：
该 Topoisomerase I 来源于牛痘病毒（vaccinia virus），通过基因重组方案制备纯化。其能解旋DNA的超螺旋结构，除此外其能识别并切割双链 DNA 末端 [5’C(T)CCTT↓]，并且与 DNA 形成共价连接形成稳定复合物。该共价复合物遇
到DNA 的5’-OH基团后，重新连接形成完整 DNA 链。因此，使用该酶可作为 DNA 连接的有效工具，可用于 DNA 的载体连接（TOPO 克隆载体制备）、接头连接（NGS 建库）等实验。
应用
DNA-载体连接
接头连接
储存：-20°C 可保存 3 年。
TOPO 酶保存液：20mM Tris-HCl，pH7.8，150mM NaCl，
0.1% Tween20，50%甘油。
反应实例 1（质粒解旋）
10×TOPO Buffer 2.5 μl
超螺旋质粒 DNA 1-20 μg
Vaccinia TOPO (5pmol/μl) 1 μl
ddH2O Up to 25 ul
37°C 孵育 5-15min。
注意：
（1）双链接头 A 通常 5’做 NH2 封闭修饰，以防止自连接；接头 A 的 CCCTT 后通常包含 5-12bp 尾巴，再长的尾巴会导致连接效率大幅下降；
（2）双链接头 B 的 5’端必须包含-OH。
（3）由于该酶应用广泛，在不同的实验中使用策略不同，需要灵活运用。
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| 大鼠角膜上皮细胞提取物【Rat Eye: Normal Corneal Epithelial CellsDerivatives】 | DH82(犬巨噬细胞) 5×106cells/瓶×2 | Anti-Oct-4 /FITC 荧光素标记胚胎干细胞关键蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml |
| KIT Others Mouse 小鼠 c-kit / CD117 人细胞裂解液 (阳性对照) 羟脯酸测试盒25支/包 | 植物25羟基维生素D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISA检测试剂盒Pla25-DihydroxyvitaminD3,HVD3ELISAKit 96T/48T | HTLV- I (Human T-lymphotropicvirus I ) ELISA Kit 人类嗜T淋巴细胞Ⅰ型病毒Multi-class antibodies规格： 48T |
| 人食管上皮细胞提取物【Human Esophageal: Normal Esophageal Epithelial Cell Derivatives】 | 细胞培养板 TC处理标准透明6孔细胞培养板 60个/盒,240个/箱 | IgM/Gold 胶体金标记的羊抗小鼠IgM 0.5ml |
| 973细胞，人肺癌细胞 小鼠成骨细胞系,MC3T3-E1细胞 CL-0138Lec1(仓鼠卵巢细胞)5×106cells/瓶×2琼脂糖凝胶6Bshēng huà shì jì容量：20KU | H4-IIE(大鼠肝癌细胞 ) 5×106cells/瓶×2 | Protein BOC： 蛋白BOC抗体 0.2ml |
| KNG1 Others Human 人 KNG1 / BDK / Kininogen-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 1,2,4-丁三醇shēng huà shì jì容量：25克 | 牛痘病毒-拓扑异构酶人骨碱性0酸酶(BALP)ELISA检测试剂盒Humanbonealkalinephosphatase,BALPELISAKit 96T/48T | Rhesus antibody Rh CIRBP 冷诱导RNA结合蛋白抗体 规格 0.2ml |
| IEC-6大鼠小肠上皮细胞系 | 大鼠前脂肪细胞完全培养基 100mL | Human immunosuppressive acidic protein,IAP ELISA Kit 人免疫抑制酸性蛋白 96T |
| 人胚胎气管组织来源细胞;CCC-HBE-284-65-1醌Anthrainoneone;9,10-entxneenedione;9,10-Dioxoentxneene;Dixy7nodiketoentxneene;Ordinary anthrainoneone;Mot | 5637(HTB-9) 人膀胱癌细胞 1ml/T75 | 人补体片断5b(C5b)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 |
| 人气管平滑肌细胞完全培养基 100mL柠檬酸无水（标准品）Citric acid质量规格：含量测定 | 人C多肽(CP)免疫试剂盒 Human C-Polypeptide,CP ELISA Kit | ELISAKit17-OHCS小鼠17羟皮质类固醇规格：48T/96T |
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文献和实验为催化 DNA拓扑学异构体相互转变的酶之总称。催化 DNA链断开和结合的偶联反应，为了分析体外反应机制，用环状 DNA为底物。在闭环状双链 DNA的拓扑学转变中，要暂时的将 DNA的一个链或两个链切断，根据异构体化的方式而分为二个型。切断一个链而改变拓扑结构的称为Ⅰ型拓扑异构酶（ top- oisomeraseⅠ），通过切断二个链来进行的称为Ⅱ型拓扑异构酶（ topoisomeraseⅡ）。属于Ⅰ型的拓扑异构酶，有大肠杆菌的ω蛋白（ω -protein，由分子量 11万
酶和连接酶两个角色。它的生物功能是在复制过程中切断并重新连接DNA。牛痘病毒拓扑异构酶I特异性地识别5’-(C/T)CCTT-3’序列，与3’T的磷酸基团形成共价键，并切断一条DNA链，使DNA解链。随后它从DNA末端撤离。为了利用拓扑异构酶的连接活性，TOPO载体被线性化，并在每个3’磷酸基团上连接了拓扑异构酶I。这样能确保载体与互补末端的迅速连接(图1)。整个连接过程只需要5分钟，就是这么简单。 如果你用的是TOPO版的TA克隆，那么基本过程与TA克隆相似，注意
菌核酸酶降解，而后再通过蛋白酶K将组蛋白消化后，DNA跑Agarose电泳便是200bp长度左右。断裂点就是在组蛋白小体与小体之间。这是一个固定的实验，根据微球菌核酸酶的酶活及处理时间，在琼脂糖凝胶电泳中可以看到200bp成倍数出现的条带。 DNA损伤包括双链损伤和单链损伤两种，损伤没有特定的断裂点，也未必是粘性末端。引起DNA双链损伤的因素有很多，比如化学药物Etoposide是抑制拓扑异构酶活性的，而拓扑异构酶在DNA复制及修复过程中发挥活性需要靠DNA的断裂和重连，抑制其活性导致DNA断裂后无法重
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