- ￥312
- 邦景
- BJ-PJ6652
- 国产
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
29
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100ml
| 产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
| Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer | BJ-PJ6652 | 100ml | 312 |
| 对目的蛋白进行检测分析时，总蛋白的提取至关重要，如蛋白提取不好会导致后续试验的不理想甚至失败，如：信号极弱或无杂交信号、背景高、非特异性条带多等.根据目标蛋白的类型和实验应用种类来选择合适的RIPA裂解液，才能程度地保证后续实验的成功。 Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer对细胞有一定的裂解能力，能获得较多的胞浆蛋白，而对细胞核的裂解能力有限，不能完全裂解细胞核，因此获得的总蛋白适用于IP或CO-IP实验；而WB Super RIPA Lysis Buffer对动物组织和细胞的裂解能力极强，它可以完全裂解细胞核和线粒体，并可提取到更多的膜蛋白，从而可获得更多的总蛋白。因其超强的裂解能力，使得大量的基因组DNA从细胞核中释放出来，使蛋白变的十分粘稠，使用Benzonase核酸酶消化可有效解决。经RIPA裂解液获得得蛋白可用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度；使用Bradford法测定由本裂解液裂解所得到样品的蛋白浓度会稍有误差。 |
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| 1.可很好的释放胞浆蛋白，部分释放膜蛋白和核蛋白。 2.经Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer，核蛋白与DNA还紧密 结合在一起，离心后会造成核蛋白的丢失。 3.对于膜蛋白，Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer的破坏力 小，不能使膜蛋白与膜充分分离，故离心后造成膜蛋白 的丢失。 4.在提取蛋白过程中，基因组DNA释放使得蛋白提取液 变的十分粘稠，影响蛋白电泳和杂交效果。 |
1.可以很好的裂解细胞膜及细胞核，从而更好的完全释放胞浆蛋白、核蛋白和膜蛋白。 2.对于核蛋白，经WB Super RIPA Lysis Buffer裂解后，核蛋白与粘稠的基因组DNA分离，离心后核蛋白存在于上清中，核蛋白的捕获率高达90%。 3.对于膜蛋白，WB Super RIPA Lysis Buffer可程度的破坏细胞膜和变性蛋白，使蛋白与膜分离，防止蛋白与膜复合物在离心后沉淀，从而防止蛋白丢失。 4.在提取蛋白过程中，基因组DNA释放使得蛋白提取液变的十分粘稠，使用Benzonase核酸酶消化可有效解决。 |
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| 储存 |
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| 置于室温阴凉处，可保存2年。 | ||
| 实例 |
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| Fig.用WB Super RIPA Lysis Buffer和Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer分别提取核蛋白PPARγ和膜蛋白PLD-1，上样量分别为40ug和10ug总蛋白，ECL发光液显色。A/C泳道为WB Super RIPA Lysis Buffer，B/D泳道为Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer。由此图比较分析表明WB Super RIPA Lysis Buffer能更充分的释放核蛋白和膜蛋白，从而获得更强的信号。 | ||
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文献和实验液，三个一起上 从以上三个结果可以看到，第一种孵育方法抗原得率最高，第三种抗原得率最低。如果靶蛋白丰度较高，第一种和第二种差别并不显著。注意，整个体系选择同样的孵育顺序，以确保结果的重复性。 5、各种 buffer 整个 co-IP 系统，涉及到裂解液，结合液，洗涤液，洗脱液，这4种溶液要如何考量呢？ 裂解液---样本质量很大程度受限于裂解液，要考虑其中的去垢剂种类。 非变性裂解液，含有非离子型去垢剂，有助于稳定天然蛋白构象，比如 IP lysis buffer。不建议使用变性裂解
了，要分开难度还是很大，这时候就要很慎重，实验过程要十分肯定检测有这么一条目的条带才行。最好还是能找到不同来源的抗体啦~~ hiqihong 不同种源的抗体WB验证有时在IgG位置也出现条带 最好的办法是用洗脱buffer洗脱 如果是用tag做的IP 则用tag肽洗脱，IgG是能洗掉的 devil19840 紫叶竹韵 wrote: 做IP，之后Western 分析，看到有两条带
with 10ml PBS • resuspend cells in 1.5ml PBS and transfer to an Eppy • centrifuge for 3min at 9,000rpm, remove supernatant • freeze pellets until further use Co-IP: 1. resuspend pellets in 100µl EBC-buffer
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