- ￥3500
- 南京万木春
- 进口/国产
- 23XR350
- 2026年01月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
/
- 库存：
现货库存
- 供应商：
南京万木春
- 肿瘤类型：
/
- 细胞类型：
永生化细胞
- 品系：
/
- 组织来源：
/
- 相关疾病：
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- 物种来源：
/
- 免疫类型：
/
- 细胞形态：
/
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 器官来源：
/
- 运输方式：
常温/干冰
- 年限：
三代内
- 生长状态：
.
- 规格：
1×10^6/T25方瓶
一、永生化小鼠结肠平滑肌细胞简介：
虽然原代小鼠结肠平滑肌细胞更能真实地反映结肠平滑肌细胞在小鼠体内的生理状态，但是一方面原代分离培养小鼠结肠平滑肌细胞周期长及对技术人员经验要求非常高，另一方面此原代细胞在体外培养生长缓慢，不能多次传代，这些不利因素制约了原代小鼠结肠平滑肌细胞在实验室的广泛应用。我公司的研究团队拥有多年原代细胞分离培养及细胞永生化服务研究经验，成功建立了永生化小鼠结肠平滑肌细胞。结肠分升结肠、横结肠、降结肠和乙状结肠4部分，大部分固定于腹后壁，结肠的排列酷似英文字母“M”，将小肠包围在内。结肠横切面由内到外依次为：黏膜（上皮层、固有层、黏膜肌层），黏膜下层（疏松结缔组织），肌层（内环形、外纵行两层平滑肌），外膜（纤维膜或浆膜）。结肠平滑肌细胞主要分布于黏膜肌层和肌层的内环形、外纵行平滑肌；结肠运动少而缓慢，对刺激的反应也较迟缓。结肠平滑肌在食物消化与吸收、肠道运动和物质分泌、诱发全身炎症反应以及细胞内信号转导途径等研究中起着重要的作用。
本公司生产的永生化小鼠结肠平滑肌细胞采用酶解法和基因转染制备而来，细胞总量约为1×106/T25方瓶，细胞纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
二、 使用方法
1 、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：
取出 T25 方瓶， 75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入 37℃ , 5%CO2 细胞培养箱中静置 2-3 小时， 以稳定细胞状态，然后打开瓶子回收瓶子中培养液作为后续培养此细胞的完全培养液（备注： 先使用瓶子中完全培养液培养及尽快冻存保种细胞， 保存种子后再尝试自己完全培养液培养观察是否适合此细胞生长，以免使用自己培养液不适合细胞生长造成细胞状态不好或死亡） ，最后按照后面细胞传代步骤进行细胞传代培养。
2 、细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 90%面积时，弃 T25 方瓶中的培养液， 用 PBS 清洗细胞 3 次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 2ml 至培养瓶中 37 度培养箱放置 3-5 分钟，倒置显微镜下观察，待细胞基本完全脱落后加入完全培养基终止消化，用滴管混匀并将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm/min，离心 5min；
3）弃上清，沉淀细胞用 10ml 完全培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代， 最后放入 37℃ ,5%CO2 细胞培养箱中培养；
4）待细胞完全贴壁后， 观察培养结果，之后进行换液培养或传代。
3 、细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 90%面积时，弃 T25 方瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞 3 次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 2ml 至培养瓶中 37 度培养箱放置 3-5 分钟，倒置显微镜下观察，待细胞基本完全脱落后加入完全培养基终止消化，用滴管混匀并将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm/min，离心 5min；
3）用适当量的冻存液（完全培养液： FBS：DMSO=7:2:1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1h，然后将其移入-80℃过夜， 24h 后转入液氮中进行长期储存（或者按照梯度程序降温模式直接放置-80 度冻存后并转移液氮中长期储存）。
4、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具） ，快速将其置入 37℃水浴中解冻， 直至冻存管中无结晶，然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞转移至含 5ml 完全培养液无菌离心管中，1000rpm 离心 5min ，然后加入 5ml 完全培养液混匀细胞， 将细胞悬液转移至 T25 培养瓶中， 放置于 37℃ , 5%CO2 细胞培养箱中培养；
3）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。
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文献和实验主要有两类：神经嵴干细胞(neuralcreststemcell，NC-SC)和中枢神经干细胞(CNS-SC)。NCSC为外周神经干细胞(PNS-SC)，既可发育为外周神经细胞、神经内分泌细胞和Schwann氏细胞，也能分化为色素细胞(pigmented cell)和平滑肌细胞等。NSC一般是指存在于脑部的中枢神经干细胞(CNS-SC)，其子代细胞能分化成为神经系统的大部分细胞。以往认为，中枢神经系统的神经元在出生前或出生后不久，就失去再生能力。但近年的一些研究表明，成年哺乳
动物组织正常及及永生化细胞3T3 swiss swiss鼠胚胎成纤维细胞3T3L1 小鼠胚胎成纤维细胞(前脂肪)3T6swiss 小鼠胚胎成纤维细胞7WCY1.0 人APP-PS1双基因转染细胞株(CHO)(B类)7WD10 人APP基因转染细胞株(CHO)(B类)7WML6.0 人APP-PS1(M146L)双基因转染细胞株(CHO)(B类)7WPS1 人APP-PS1双基因转染细胞株(CHO)(B类)BaF3 小鼠原B细胞(B类)BHK-21 金黄
、物理、病毒等方法）诱导细胞发生转化，使其倍增时间减少，永生化或生命期延长，也是一个努力方向。 但是要建立适于组织工程需要的种子细胞，需要解决以下问题：①增加细胞的增殖能力；②延长细胞的生命期；③提高细胞的分泌能力；④优选不同组织来源的同一功能的最佳细胞；⑤建立标准细胞系，使研究工作有更好的可比性和科学性；⑥同种异体与异种移植的免疫学；⑦细胞与人工细胞外基质的相互作用及影响因素。 采用同种异体细胞来源，在目前仅对少数组织细胞（如软骨组织的组织工程培养）有望获得
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