大鼠外周血单个核细胞(原代)
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大鼠外周血单个核细胞(原代)

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  • 南京万木春
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  • 2025年11月23日
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      南京万木春

    • 肿瘤类型

      /

    • 细胞类型

      原代细胞

    • 品系

      /

    • 组织来源

      /

    • 相关疾病

      /

    • 物种来源

      /

    • 免疫类型

      /

    • 细胞形态

      /

    • 是否是肿瘤细胞

    • 器官来源

      /

    • 运输方式

      常温/干冰

    • 年限

      /

    • 生长状态

      /

    • 规格

      5×10^5/T25方瓶

    一、大鼠外周血单个核细胞简介:

    外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell, PBMC)是外周血中具有单个核的细胞,包括淋巴细胞和单核细胞。单核细胞(Mo)是在血液中循环的未成熟的吞噬细胞。作为一种递呈抗原的免疫细胞,他们能吞噬和降解微生物和颗粒物质。单核细胞能够分化为几类不同的细胞类型。单核细胞最常见的应用是体外分化成为单核细胞来源的树突状细胞(moDC),巨噬细胞和成骨细胞以及它们作为吞噬免疫细胞在免疫学和感染生物学方面的作用。
    本公司生产的大鼠外周血单个核细胞采用密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×105/T25方瓶,细胞纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
    二、 使用方法

    1 您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:

           取出 T25 方瓶, 75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入 37 , 5%CO2 细胞培养箱中静置 2-3 小时, 以稳定细胞状态,然后打开瓶子回收瓶子中培养液作为后续培养此细胞的完全培养液(备注: 先使用瓶子中完全培养液培养及尽快冻存保种细胞, 保存种子后再尝试自己完全培养液培养观察是否适合此细胞生长,以免使用自己培养液不适合细胞生长造成细胞状态不好或死亡 最后按照后面细胞传代步骤进行细胞传代培养。
    2 、细胞传代:
           1)细胞生长至覆盖培养瓶的 90%面积时,弃 T25 方瓶中的培养液,  PBS 清洗细胞 3 次;
          2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 2ml 至培养瓶中 37 度培养箱放置 3-5 分钟,倒置显微镜下观察,待细胞基本完全脱落后加入完全培养基终止消化,用滴管混匀并将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm/min,离心 5min
            3)弃上清,沉淀细胞用 10ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代, 最后放入 37 ,5%CO2 胞培养箱中培养;
            4)待细胞完全贴壁后, 观察培养结果,之后进行换液培养或传代。
    3 、细胞冻存
           1)细胞生长至覆盖培养瓶的 90%面积时,弃 T25 方瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞 3 次;
           2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 2ml 至培养瓶中 37 度培养箱放置 3-5 分钟,倒置显微镜下观察,待细胞基本完全脱落后加入完全培养基终止消化,用滴管混匀并将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm/min,离心 5min
            3)用适当量的冻存液(完全培养液: FBSDMSO=7:2:1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
            4)先将细胞冻存管放置于-20 1h,然后将其移入-80℃过夜, 24h 后转入液氮中进行长期储存(或者按照梯度程序降温模式直接放置-80 度冻存后并转移液氮中长期储存)。
    4、细胞复苏:
           1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具 快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;

           2)将冻存管中的细胞转移至含 5ml 完全培养液无菌离心管中,1000rpm 离心 5min ,然后加入 5ml 全培养液混匀细胞, 将细胞悬液转移至 T25 培养瓶中, 放置于 37 , 5%CO2 细胞培养箱中培养;
          
    3
    第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。

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    图标文献和实验
    该产品被引用文献

    Effect of nasal septum correction under nasal endoscope on serum ECP,TIgE and IL⁃6 levels in patients with OSAHS and chronic rhinosinusitis
    期刊:J Mol Diagn Ther, June 2023, Vol. 15  No. 6
    作者:WANG Hongxin,SHI Baoyu★ , AN Na
    DOI:10.19930/j.cnki.jmdt.2023.06.025
     

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