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尿素(Urea)/尿素氮含量(脲酶法),微板法

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  • ￥150
  • wksubio
  • WS1021W
  • 国内
  • 2025年10月20日
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    • 英文名：

      Urea/Urea nitrogen content (urease method)

    • CAS号：

      WS1021W

    • 保质期：

      3个月

    • 供应商：

      上海瓦兰生物

    • 保存条件：

      4℃

    • 规格：

      96T

    本试剂盒仅供科研使用
    尿素（Urea）含量（酶法）检测试剂盒说明书
    （货号：WS1021W 微板法 96 样）
    一、产品简介：
    尿素（Urea）又称碳酰胺，旧称尿素氮（BUN），是哺乳动物和某些鱼类体内蛋白质
    代谢分解的主要含氮产物，也是目前含氮量最高的氮肥。
    该试剂盒利用尿素在脲酶的作用下水解产生氨离子和二氧化碳，氨离子在碱性介质中
    与酚显色剂生成蓝色物质，该物质的生成量与尿素含量成正比。通过于625nm处检测该
    有色物质含量进而得出尿素氮含量。
    二、试剂盒组分与配制：
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    试剂一
    粉体 mg×1 支
    -20℃保存 临用前甩几下使粉体落入底部，再
    加
    1.1mL 的蒸馏水溶解备用。
    试剂二
    液体 3mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂三
    试剂三 A×2 支
    试剂三 B×1 支
    4℃保存
    临用前向一支试剂三 A 中加入 46μL
    的试剂三 B，混匀备用。
    标准管
    粉体 mg×2 支
    4℃保存
    每支临用前加1mL蒸馏水溶解，即浓
    度为6mg/mL的尿素，检测前再用蒸馏
    水稀释200倍（5:995）即成0.03mg/mL
    （0.5mmol/L）的尿素。
    三、所需仪器和用品：
    酶标仪、96 孔板、天平、移液器、离心机、蒸馏水。
    四、尿素（Urea）含量检测：
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实
    验样本和试剂浪费！
    1、样本制备：
    ① 液体样品：液体样品：澄清的液体可直接检测；若浑浊则离心后取上清液检测。
    ② 细菌/细胞样本：
    先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约 500 万细菌或细胞加入 1mL 生
    理盐水，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30
    次）；12000rpm 室温离心 10min，取上清，置冰上待测。
    【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（104）：提取液（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。
    2、上机检测：
    ① 酶标仪预热 30min，设置温度在 37℃，设定波长到 625nm。
    ② 做实验前选取 2 个样本，找出适合本次检测样本的稀释倍数 D（如：尿液样本可用
    蒸馏水稀释 100 倍）。
    ③ 所有试剂解冻至室温，在 96 孔板中依次加入：本试剂盒仅供科研使用
    2
    试剂名称
    （μL）
    测定管
    空白管
    （仅做一次）
    标准管
    （仅做一次）
    样本
    20
    蒸馏水
    20
    标准品
    20
    试剂一
    10
    10
    10
    蒸馏水
    130
    130
    130
    混匀，37℃避光反应 15min
    试剂二
    20
    20
    20
    试剂三
    20
    20
    20
    混匀，37℃避光反应 20min，于 625nm 处读取吸光值 A，
    △A=A 测定-A 空白。
    【注】：1.测定管的 A 值若超过 1.5，可把样本用生理盐水或蒸馏水进行稀释，稀释倍数 D 代入计
    算公式。
    2.若△A 的差值在零附近徘徊，可增加样本加样量 V1（如增至 50μL，则蒸馏水相应减少，
    保持总体积不变；空白管和标准管维持不变），则改变后的 V1 需代入公式重新计算。
    五、结果计算：
    1、按液体体积计算：
    尿素含量(mg/L)=(C 标准×V 标)×103×△A÷(A 标准-A 空白)÷V1×D
    =30×△A÷(A 标准-A 空白)×D
    尿素含量(mmol/L)=(C 标准×V 标)÷60.04×103×△A÷(A 标准-A 空白)÷V1×D
    =0.5×△A÷(A 标准-A 空白)×D
    2、按细胞数量计算：
    尿素含量(ng/104 cell)=(C 标准×V 标)×106×△A÷(A 标准-A 空白)÷(500×V1÷V)×D
    =60×△A÷(A 标准-A 空白)×D
    尿素含量(nmol/104 cell)=(C 标准×V 标)÷60.04×106×△A÷(A 标准-A 空白)÷(500×V1÷V)×D
    =△A÷(A 标准-A 空白)×D
    C 标准---尿素标品浓度，0.03mg/mL；
    D---稀释倍数，未稀释即为 1；
    V1---加入样本体积，0.02mL；
    V 标---加入标准品体积，0.02mL；
    V---提取液体积，1mL；
    60.04---尿素分子量；
    500---细胞数量，万。

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    • 尿素 urea

      CO（ NH2 ） 2 ，亦称脲。相当于碳酸的二酰氨。在人的蛋白质分解最终产物中占有相当大的比例。在普通膳食的情况下，每日尿中可排出 25— 30克，接近尿中总氮量的 87％。一般来说，两栖类的成体、软骨鱼类和哺乳类具有相同的倾向。因在这些生物体中，尿素是在鸟氨酸循环中形成的，所以排出尿素的动物具有所必需的整个酶系统，在动物中欠缺其中任何一种酶便排出尿酸（鸟类）或氨（硬骨鱼类）。刀豆和大豆植物的种子中存在很多的脲酶，它可使尿素水解为二氧化碳和氨。尿素也是很重要的肥料。  

    • 双向电泳溶液配制大全

      如果需要，尿素的浓度可以调高到 9或者 9.8M，也可用 7M Urea，2M Thoiurea。 ②其他的去垢剂(如 Triton X-100，NP-40，还有其它的非离子去垢剂或者双性离子去垢剂)可以取代 CHAPS。 ③如果需要，蛋白质酶的抑制剂和或者还原剂可以加入。 B.水化液 (不含有 IPG buffer, Rehydration stock solution without IPG buffer) (8M Urea, 2% CHAPS, bromophenol blue,25

    • 双向电泳溶液配制方法

      4%(w/v) 1.6g Pharmalyte3-10 2% 800μl Double distilled H2O    To 40ml 新鲜配制或者分装贮存于-20℃        ① 如果需要，尿素的浓度可以调高到 9或者 9.8M，也可用 7M Urea，2M Thoiurea。

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