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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
58
- 英文名:
Madurella mycetomatisPCR
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 足马杜拉分枝菌PCR检测试剂盒 | 50T | LZ-P944 |
【检验原理】
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,引物和探针经过优化,灵敏性高,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标DNA高度保守区设计,不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应,既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级,本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取:核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
3.1如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板)。
| XCL2 Others Human 人 XCL2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | ELISAKitTPO-Ab小鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体规格:48T/96T |
| EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0903 | 猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T |
| 人肾管状上皮细胞完全培养基 100mL | 人氧还原蛋白过氧化物酶4(PRDX4)elisa试剂盒 |
| EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK (aa 563-987) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | 组织PKCη激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次 |
| 小鼠B细胞杂交瘤细胞;W6/32 | Humaarate-resistaacidphosphatase5b,ACP-5bELISAKit 人抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)elisa试剂盒 |
| CDK7/Cyclin H/MAT1 周期素依赖性激酶7抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg | 小鼠卵泡抑素(FS)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 |
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| HIAT1: 海马丰富基因转录蛋白1抗体 0.2ml | 大鼠Ⅲ型前胶原基端肽(PⅢ)elisa试剂盒 |
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| 骨形态发生蛋白-2抗体 Anti-BMP2 0.1ml | 抑制与产生超氧阴离子自由基(O2•)测试盒 Inhibition and generation of superoxide anion free radical (O2) test case |
| HSP-40 ELISA Kit 大鼠热休克蛋白40 96T | 人发动蛋白2elisa试剂盒 |
| Rhesus antibody Rh TRH 促甲状腺素释放激素抗体 规格 0.1ml | 人囊性纤维化跨膜传导调节因子(CF)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human CF (Cystic Fibrosis ansmembrane Conductance Regulator) ELISA Kit |
| Rhesus antibody Rh NPY1R 神经肽Y1受体抗体 规格 0.1ml | 足马杜拉分枝菌PCR检测试剂盒人早期生长应答蛋白4(EGR4)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human EGR4 (Early Growth Response Protein 4) ELISA Kit |
| 瘦素受体(Lepti)elisa试剂盒 | 小鼠肝炎病毒抗体(HV-Ab)elisa试剂盒 |
| 人还原型谷胱甘肽(GSH)elisa试剂盒 | 猪食欲素/阿立新B(OX-B)elisa试剂盒 |
【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
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文献和实验【分享】iCubate全自动多重微生物核酸检测系统-----扩增子拯救多重PCR技术(ARM-PCR)
目前基于iCubate平台已开发出包括呼吸道病原体V组(20种)、呼吸道病原体B组(9种)、流感病毒分型(8种)、医院获得性感染病原体(14种)、腹泻相关病原体(13种)、STD相关病原体(10种)、分枝菌属(13种)、葡萄球菌(9种)等8个多重PCR检测试剂。实验室人员还可以根据iCubate 2.0试剂开发平台应用ARM-PCR技术开发相应的多重PCR检测病毒试剂盒,开发成功,销售收益可和icubate分享。 总之,iCubate全自动多重微生物核酸检测系统具有多重、自动、封闭、快速
,我专门购买了大肠杆菌基因组提取试剂盒,花了500个银子,实际上根本不必买,在取目的基因时只要用适量的菌液就好。(当然,因实验而异,对基因组纯度要求高的实验还是需要提取试剂盒) 4:回收高保真酶扩增的PCR产物,NdeⅠ,SalⅠ双酶切,上同样用NdeⅠ,SalⅠ双酶切的PET28载体(需要SAP处理),转化BL21(DE3)表达菌株。由于刚刚购买的NdeⅠ,SalⅠ活性很低,因此在表达载体构建时消耗了大量时间,当确认感受态和转化方法没有问题,转化结果表现为:(1)表达载体没有经过SAP处理时,平板
原体,枝原体,类菌质体),动物医学文献译为“霉形体”或“支原体”,台湾、香港则译为微浆菌。 支原体是目前已知一类能在无生命培养基上生长繁殖的最小的原核细胞型微生物。自然界分布广泛,种类多,有80余种,分为两个属:一为支原体属(Mycoplasma),有几十个种;另一为脲原体属(Ureaplasma),仅有一种。与人类感染有关的主要是肺炎支原体和解脲脲原体。 支原体无细胞壁,多呈不规则球状、长丝状,可分枝,营寄生共生或腐生。一般侵害对象为动植物,可造成多种疾病。 细胞培养(特别是传代细胞)被支原
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