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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
20
- 英文名:
DMS 273
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| DMS 273细胞 | T25瓶 | LZ-X969145 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| 15%绵羊红细胞(无菌) | 钾离子通道激活剂(Diazoxide) |
| 人脏器组织淋巴细胞分离液试剂盒 | HCV NS5A抑制剂(Ombitasvir) |
| 鹅脏器组织中性粒细胞分离液试剂盒 | BxPC-3人原位胰腺腺癌细胞 |
| Caspase 3 活性检测试剂盒 | LLC-MK2恒河猴细胞 |
| MTT细胞增殖检测试剂盒 | CaEs-17, 人食管癌细胞株 Human 现货 |
| 改良番红O-固绿软骨染色液 | 大鼠气管平滑肌细胞完全培养基100mL |
| 卡氏肺囊虫染色液(改良Lendrum法) | A2780(人癌细胞)5×106cells/瓶×2 |
| 表皮生长因子受体抑制剂(EGFR抑制剂) | 小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs) |
| STAT3抑制剂(Cryptotanshinone) | 猕猴肺细胞;MML2 |
| REV-ERBα/β激动剂(SR9009) | 正常大鼠肾细胞;NRK |
| 去泛素化酶(deubiquitinase(USP))抑制剂(DUBs-IN-3) | RA, 大鼠星形胶质细胞 Rattus |
| I型HDAC抑制剂(4SC-202) | 小鼠海马趾神经细胞(MH-h)(1×106) |
| DMS 273细胞KSP抑制剂(SB-743921) | GBC-SD(人胆囊癌细胞) 5×106cells/瓶×2 |
| tankyrases抑制剂(MN-64) | HBE(人支气管上皮样细胞) 5×106cells/瓶×2 |
| Raf激酶抑制剂(L-779450) | 人结肠癌细胞 英文名称: LOVO |
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文献和实验DMS Chemical Footprinting of RNA
10X CE 9 mL H2O DMS Solution: 15 uL 100% ETOH 3 uL DMS Quench Solution: 1.4 mL 2-beta-mercaptoethanol 0.5 mL 3 M Sodium Acetate (Ambion
PCR 在DMS/BMD基因诊断中的应用 DMD(Duchenne Muscular Dystrophy)和BMD(Becker Muscular Dystrophy)是一种常见的X连锁隐性遗传病,主要发生于男性,其发病率为1/3500活产男婴,其发生的原因是Dystrophin(抗肌萎缩蛋)其固缺陷所致. 一、DMD/BMD的临床表现 在临床上DMD较BMD常见,发病早,症状重,正常于2-3岁即出现骨骼肌无力的表现,一般从骨盒带肌肉无力开始而出现一系列的特殊症状:走路困难呈
,出现Gower's征,腓肠肌进行性肥大.逐渐出现心肌细胞受损,约30%的小儿智能力缺陷.在12岁左右失去能力,至20岁时正常死于呼吸衰竭和心力衰竭.而BMD相对来说症状较轻,进展亦较慢. 二、DMD/BMD的遗传病 (一)遗传方式:X-连锁隐性遗传,发病者多为男性,其母亲为致癌基因携带者,尚有1/3的患者为散发病例,则新生突变引起. (二),DMD/BMD的致病基因:1.基因定位: DMD/BMD是因位于Xq21,其基因非常大约为2400Kb. 2.基因
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