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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
Hp2/o人跟骨髓瘤细胞
- ATCC Number：
/
- 细胞类型：
科研细胞
- 肿瘤类型：
/
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 库存：
10
- 英文名：
Hp2/o
- 生长状态：
/
- 年限：
尽快解冻复苏细胞进行培养
- 运输方式：
快递形式
- 器官来源：
/
- 是否是肿瘤细胞：
/
- 细胞形态：
正常
- 免疫类型：
Hp2/o人跟骨髓瘤细胞
- 物种来源：
Hp2/o人跟骨髓瘤细胞
- 相关疾病：
Hp2/o人跟骨髓瘤细胞
- 组织来源：
Hp2/o人跟骨髓瘤细胞
- 规格：
1x10^6
细胞特性：
1） 来源：见说明
2） 形态：请直接向我司客服索取
3） 含量：>1x10^6 细胞数
4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
5） 用途：仅供科研使用。
6） 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：
取出25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀细胞用12ml完全培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，最后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm离心5min；
3）用适量的冻存液（基础培养基：FBS：DMSO=5:4:1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。
4、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中， 1500rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀用5ml完全培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。
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文献和实验脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞（P3-X63/Ag8）融合，融合的细胞既获得了亲代脾细胞分泌特异性抗体的特性，又具有骨髓瘤细胞大量繁殖的能力，成为一种既能分泌特异性抗体又能长命的杂交瘤细胞。该技术为抗体的分子生物学研究提供了全新的手段。极大地促进了免疫学，遗传学，分子生物学的快速发展。 但传统抗体目前也面临诸多问题，如： 每使用一管新抗体都需要进行滴定测试； 多种同型对照，实验设计繁琐； 需要添加Fc阻断试剂； 抗体不佳，阳性细胞群不明显； 抗体作为细胞生物学和生物化学中最重要的试剂之一，科学界每年在这类
DNA，因而对HAT敏感。 目前常用的小鼠骨髓瘤细胞系为SP2 /O和NS-1 ，X63Ag8.653等。均来自BALB/c小鼠骨髓瘤。刚复苏的瘤细胞需在含10％新鲜小牛血清的RPMI-1640培养液中，5％CO2 37℃ 孵箱培养。每2～3天换液一次，3～5天传代一次，待细胞生长稳定后方可供细胞融合用。生长良好的细胞，在倒置显微镜下观察为圆形明亮，排列整齐、形态完整，密度适宜(0.1～1×106 个/ml)。经台盼蓝染色，活细胞数应>90％。实验室培养的骨髓瘤细胞最好每隔3～6个月将细胞
率及所产生的杂交瘤细胞系的稳定性等方面均可与PS-X63-Ag8或P3-NS1/1-Ag4-1相比拟。 4．小鼠P3-X63-Ag8-U1（1980年Sharon）。是P3-X63-Ag8骨髓瘤细胞系的变系。P3-X63-Ag8分泌重链（rl）和轻链（K），P3-NS1/1-Ag4-1则只合成而不分泌轻链（K）。 5．小鼠SP2/O-Ag14（1978年Shulman）。Kohler等将PS-X63-Ag8骨髓瘤细胞系与具有抗绵羊红细胞活性、产生r2b重链和K轻链的BALB/c小鼠
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