脆弱拟杆菌活化培养基肉汤（BPRMB）

大肠杆菌细胞超声波破碎

琼脂 ，制成固体培养基，用作菌种活化与保藏)。 三、操作方法 1、细胞培养 和收集：将活化菌种接入肉汤培养基中，于37℃振荡培养。当到达对数生长期后(约6h)，用离心机 收集细胞，8000r/min离心5min，或3000r/min离心20min。 2、在显微镜下观察细菌 的形态特征。 3、细胞破碎：取湿细胞50-100mg悬浮于1ml细胞破碎缓冲液中。用20kHz频率，150W的功率，在冰浴中进行超声波破碎，每破碎60s，间隔60s，反复

Ames 试验（沙门氏菌回复突变试验）方法及导则

，加入无菌试管中，将主平板或冷冻保存的菌株培养物接种于营养肉汤培养基内，37 ℃ 振荡（100 次/min）培养 10 h。该菌株培养物应每毫升不少于 1～2×109 活菌数。11.2 平板掺入法 实验时，将含 0.5 mmol/L 组氨酸 -0.5 mmol/L 生物素溶液的顶层琼脂培养基 2.0 mL 分装于试管中，45 ℃ 水浴中保温，然后每管依次加入试验菌株增菌液 0.1 mL，受试物溶液 0.1 mL 和 S9 混合液 0.5 mL（需代谢活化时），充分混匀，迅速倾入底层琼脂

细菌的生物化学试验

异变形杆菌的VP试验和MR试验常同为阳性。 6．胆汁七叶苷水解试验 （1）原理：在10%~40％胆汁存在下，测定细菌水解七叶苷的能力。七叶苷被细菌分解生成的七叶素，七叶素与培养基中的枸橼酸铁的二价铁离子发生反应形成黑色化合物。 (2)方法：将被检菌接种于胆汁七叶苷培养基中，35℃孵育18~24h后，观察结果。 (3)结果：培养基完全变黑为阳性，不变黑为阴性。 (4)应用：主要用于鉴别D群链球菌与其它链球菌的区别，以及肠杆菌科的某些种、某些厌氧菌（如脆弱拟杆菌等）的初步鉴别。D群链球菌本试验