- ￥120
- 百生跃(Bioleaper)
- BR3108576
- 上海
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
999
- 供应商：
百生跃(Bioleaper)
- 英文名：
LB Broth
- 规格：
250g
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文献和实验感受态细胞的制备： 1， 把DH5菌种分别接种在含氨卞的LB平板和不含氨卞的LB平板上，培养16-18小时。结果在不含氨卞的LB平板上DH5菌长出单个菌落，而在含氨卞的LB平板上无可见菌落生成，证明DH5菌未被杂菌污染； 2， 挑取单个菌落接种于2ml不含氨卞的LB肉汤，37度，150rpm,，振荡培养过夜； 3， 取上述0.2ml菌液接种于30ml不含氨卞的LB肉汤，37度，150rpm,，振荡培养3小时，使其OD600=0.4; 4， 将上述培养物转入40ml离心管，冰浴10
沉淀加入750μl预冷的（4℃）75mmol/L CaCL2 溶液，轻轻吹打菌悬液，放冰浴30min。 5．4℃3000rpm/min,离心5min，弃上清。 6．菌体沉淀加入200微升预冷的75mmol/LCaCL2溶液，冰浴4min以上。4℃保存备用。 （二）质粒转化 【材料】 1．pBR322 质粒DNA, 2．感受态菌75mmol CaCl2 3．LB肉汤培养基，无药LB琼脂平板，氨苄青霉素琼脂平板（50ug/ml） 4．
6) 菌体沉淀加入200微升预冷的75mmol/LCaCl2 溶液，冰浴4min以上。4℃保存备用。 2. 质粒转化 1) 取2个洁净，灭菌的EP管，加入各成分。 2) 上述2个试管充分混均匀后，置冰浴30min。 3) 42℃2min或37℃5min，立即置冰浴2min。 4) 加入1ml LB肉汤培养基，37℃静止培养1h。 3. 转化子筛选 1) 取实验组培养菌液涂布在氨苄青霉素琼脂平板（50ug/ml
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