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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- 细胞类型:
详见说明书
- 肿瘤类型:
-
- 供应商:
武汉赛奥斯生物
- 库存:
99
- 英文名:
-
- 生长状态:
详见说明书
- 年限:
-
- 运输方式:
活细胞/冻存
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
-
- 细胞形态:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
-
- 组织来源:
详见说明书
- 规格:
1×10⁶cells
永生化小鼠结肠黏膜上皮细胞
产品编号: CL-123m
一.细胞描述
结肠在右髂窝内续于盲肠,在第3骶椎平面连接直肠。结肠分升结肠、横结肠、降结肠和乙状结肠4部,大部分固定于腹后壁,结肠的排列酷似英文字母“M”,将小肠包围在内。结肠横切面由内到外依次为:粘膜(上皮层,固有层,粘膜肌层),粘膜下层,肌层,外膜。结肠黏膜上皮在环境或遗传等多种致癌因素作用下导致结肠癌,是最常见的恶性肿瘤之一。因此,体外培养结肠黏膜上皮细胞为研究进一步结肠癌等疾病提供了前提和基础,该细胞通过慢病毒转染的方式携带SV40基因。(注意事项: 收到细胞后第一次传代建议1:2传代,充液培养基是维持培养基,不能用来培养细胞)
二.细胞特性
(1)组织来源于实验动物的正常结肠组织。
(2)细胞鉴定:细胞角蛋白-18(CK-18)免疫荧光染色为阳性。
(3)经鉴定细胞纯度高于90%。
(4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
(5)细胞生长方式:铺路石状细胞,不规则细胞,贴壁培养。
三.推荐培养基
我们推荐使用SAIOS原代上皮细胞培养基(货号:PM-001)作为体外培养小鼠结肠黏膜上皮细胞永生化细胞的培养基。
| 名称 |
体积 |
浓度 |
保存条件 |
| 原代上皮细胞基础培养基 |
500ml |
1× |
4℃、避光 |
| 原代上皮细胞培养添加剂 |
5ml |
100× |
-20℃、避光 |
| 胎牛血清(FBS) |
10ml |
终浓度2% |
-20℃、避光 |
| 双抗(青霉素/链霉素,P/S) |
5ml |
100× |
-20℃、避光 |
四.运输和保存
(1)冻存细胞:1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)复苏好的活细胞:T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
网址:www.51cells.cn
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文献和实验实验材料:1. 动物胎体胃黏膜,胃溃疡或胃癌手术切除的正常胃黏膜组织2. 1%Ⅳ胶原蛋白或1%明胶铺培养瓶,4℃冰箱内过夜,使用前在37℃培养箱内放置2h,然后用培养液浸洗1次。3. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素,pH7.44. 250000U/LⅠ型胶原酶或125000U/LⅠ型胶原酶和0.5%透明质酸酶,DMEM配置5. 解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊6. 离心管(15ml、50
胎鼠,放入70%乙醇中消毒1min。经腹正中切口取出小肠,放入预冷的PBS中。 2. 用PBS冲洗后,剪除肠系膜。纵行剪开肠壁,用PBS冲洗3次,洗去粘液。 3. 将肠壁剪成1mm3 左右的小块的组织块,放入20ml消化液中,37℃水浴中振荡消化30min。 4. 用吸管反复吹打组织块3-5min,然后以1000r/min,离心5min。吸去消化液后,加入PBS,反复吹打,悬浮沉淀的肠绒毛组织。在相差显微镜下观察可见单个黏膜上皮细胞或隐窝细胞团。 5. 将消化下来的细胞
2-3次,将黏膜剪成约1mm3 大小的组织块。 2. 将植块放入培养皿中,上皮面朝下;也可在培养皿内放入盖玻片,将组织块放在盖玻片上培养。 3. 当组织块贴壁后,加入适量培养液,培养液的量为能湿润组织块但不使组织块浮起为宜,在37℃、5%CO2 培养箱内静置培养。 4. 组织块贴壁1-3d后,补充培养液。以后每隔2-3d换液1次。 5. 植块培养3d后,细胞从植块边缘迁出。1周后,细胞向外迁移扩展,并逐渐分化,细胞的形态逐渐趋向正常食管黏膜上皮细胞











