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- 技术资料
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999
- 供应商:
武汉赛奥斯生物科技有限公司
- 肿瘤类型:
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- 品系:
原代细胞
- 组织来源:
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- 相关疾病:
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- 物种来源:
小鼠
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- 运输方式:
常温/干冰
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- 生长状态:
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- 规格:
5×10⁵cells
小鼠腹膜间皮细胞
产品编号:PC-233m
产品规格:>5×105cells
包装规格:1ml冻存细胞悬液或T-25培养瓶
一.细胞描述
腹膜是指在存在高等脊椎动物腹腔中的一层浆膜,主要由间皮及其外面的结缔组织构成。腹膜包覆大部分腹腔内的器官,能分泌黏液润湿脏器的表面,减轻脏器间的摩擦。腹腔脏器的血液、淋巴和神经组织经由腹膜与外界相连。腹膜也具有吸收撞击保护内脏的效果。
腹膜间皮细胞是构成腹膜的主要细胞群体,能分泌多种细胞因子,是腹膜原发肿瘤的实质细胞,在腹膜纤维化和腹膜黏连形成中也起着关键作用。
二.细胞特性
1)组织来源于实验动物的正常腹膜组织。
2)细胞鉴定:波形蛋白(Vimentin)或角蛋白(Keratin)免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:三角形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
三.培养建议
小鼠腹膜间皮细胞的体外培养周期有限,建议使用本公司配套的原代细胞专用培养基和正确的培养方法来解冻、传代,以此保证细胞具备良好的增殖和分化能力。推荐使用:原代间质细胞培养基(货号:PM-025)。
名称 |
体积 |
浓度 |
保存条件 |
原代间质细胞基础培养基 |
500ml |
1× |
4℃、避光 |
原代间质细胞培养添加剂 |
5ml |
100× |
-20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) |
50ml |
终浓度10% |
-20℃、避光 |
双抗(青霉素/链霉素,P/S) |
5ml |
100× |
-20℃、避光 |
四.细胞运输和保存
视气温状况、运输距离,客户与公司协商后选择下述一种运输方式:
(1)T25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输。收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
(2)1ML冻存细胞悬液装于1.8ML的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输。收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
五.产品用途
本产品只提供给进一步的科研使用,不可应用于治疗等其他方面。
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文献和实验有可以贴附的支持物表面,细胞依靠自身分泌的或培养基中提供的贴附因子才能在该表面上生长,繁殖。正常贴壁细胞在培养几天后,会逐渐贴满整个瓶底或者皿底,有的呈纤维状,有的呈多边形。 贴壁细胞相对于悬浮细胞来说,更容易感染,腺病毒和慢病毒均可感染贴壁细胞,感染效率也比较高。贴壁细胞感染步骤可参考汉恒生物慢病毒/腺病毒操作手册。 图 1:慢病毒感染不同贴壁细胞 二、原代细胞 原代细胞(primary culture cell)是指从机体取出后立即培养的细胞。一般把培养的第 1 代细胞与传 10 代以内的细胞统
小鼠腹水及单细胞悬液制备流程 配制 6% 淀粉肉汤。 6% 淀粉肉汤配制方法:牛肉膏 0.3g、蛋白胨 1.0g、氯化钠 0.5g、蒸馏水 100mL,上述材料混合加热后加入可溶性淀粉 6.0g;溶解后,121℃ 高压灭菌 15~20 min,EP 管分装封口,将肉汤放置于 4℃ 保存。 小鼠腹腔注射 1mL 6% 淀粉肉汤(注意避开肠管和内脏),刺激 60~72h。 颈椎脱臼法处死小鼠,用 75% 酒精浸泡小鼠 5min。 将小鼠置于解剖板中,固定四肢,剪开皮肤,充分暴露腹膜。 用眼
小鼠脾脏单细胞悬液制备流程 a)研磨法 小鼠颈椎脱臼处死,置于75%酒精浸泡5 min后,取出小鼠,置于无菌操作台上,左腹侧朝上。 小鼠左腹侧中部剪开小口,撕开皮肤,暴露腹壁,可见红色长条状脾脏。 脾脏下侧提起腹膜,剪开后上翻,暴露出脾脏。用镊子提起脾脏,眼科剪分离脾脏下面的结缔组织,取出脾脏,并浸泡于干净的PBS溶液中。 将脾脏置于200目筛网中,用组织研磨棒轻轻研磨至没有明显红色块状物。 用15 mL PBS冲洗筛网,并将冲洗液收集于15 mL离心管,300 g离心5 min,弃上清
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