MES/SDS 缓冲液 - 20X

常用缓冲液配制

20X 2L 4L 6L 150 mM NaCl 175.3 g 350.6 g 701 g 1052 g 15 mM Na3Citrate 88.3 g 176.6 g 353 g 530 g Mix, adjust pH to 7.0 with HCl, and store at 4 C 25X SSC (Adjust pH 7.4) 25X 1L 4L 3.0 M NaCl 219 g 876 g 0.3 M Na2Citrate 110 g 440

双向电泳样品缓冲液选用的基本原则

1、蛋白质样品的特征：复杂，含盐或其他污染物易被蛋白酶降解动态范围宽（>X106）溶解性不均一（疏水性/亲水性）分子量、等电点的范围宽（10-500KDa，pH2-14）2、样品分离的基本要求：高灵敏度和分辨率宽动态范围小样品体积高通量合适的温度和pH避免蛋白酶降解适合与高灵敏度的质谱联用尽量少的操作步骤减少污染和损失3、样品缓冲液的组成：3.1 尿素：一种中性变性剂，破坏氨基酸残基之间的非共价键和离子键而不影响等电聚焦，浓度范围5-9.8mol/L，溶液不稳定，降解生成的氰酸根离子与蛋白

【原创】实验室常用缓冲液配置方案

/氯仿/异戊醇（25 : 24 : 1)。氯仿可使蛋白质变性并有助于液相与有机相的分离，而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。 2. 配制方法：将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇（24 : 1）混合均匀后，移入棕色玻璃瓶中4℃保存。 8）10％ (W/V) SDS 组份浓度：10％ (W/V)SDS 配制量：100ml 配制方法： 1.称量10g高纯度的SDS置于100-200ml烧杯中，加入约80ml的去离子水，68℃加入溶解 2.滴加浓盐酸调节pH值至7.2