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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
| 产品编号 | PLG101 |
|---|---|
| 产品名称 | M13噬菌体文库构建试剂盒 |
| 产品描述 | The M13 Cloning Kit could be used for phage display library construction and is best used to display small peptides, i.e. sequences of 50 amino acids or less. The M13KE Vector is based on M13mp18 containing the entire M13 genome, with specific cloning sites at the 5’gIII, encoding pIII coat protein. The short peptide sequences are displayed as N-terminal pIII fusions. |
| 规格 | 1 set |
| 展示肽 | peptides about 50 amino acids or less |
| 特异性序列 | / |
| 浓度 | / |
| 试剂盒成分 | M13KE gIII Cloning Vector M13 Extension Primer |
| 保存条件 | Store at -20°C. Avoid repeated freezing and thawing cycles. |
| 运输条件 | Shipped on ice packs. |
| Note | For research use only. |
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文献和实验・ M13 Phage (Michael Blaber) Very useful background information about M13: its infection, replication, packing, cloning. If you are new to phage culture, it will be great beneficial to read this. ・ Large Scale M13
噬菌体: M13KE T7宿主细胞 : ER2738 BL21/BLT5403/BLT5615噬菌体释放方式: M13噬菌体溶源性,不裂解宿主菌。极大地简化了每轮淘选过程中的噬菌体纯化步骤,只用简单的PEG沉淀方法即可。 T7是裂解性的,其展示的蛋白不需分泌。这一优点使更多的序列可能被展示。 但不利于提纯。融合方式:M13噬菌体N端与pIII蛋白融合,不适合克隆cDNA,因为cDNA中为oligo d(T))常位于翻译终止密码子的下游。T7噬菌体C端与T7基因10 衣壳
我根据分子克隆上的经典方法提取M13噬菌体单链DNA,第一次就成功。但是随后几次,试剂和方法都一样,在可以看见噬菌体白色沉淀的基础上(量足够多),却怎么也提不出来,最后乙醇沉淀时,一片空白。请求各位大侠指点迷津。谢谢 ! 既然首先可以成功,说明方法肯定没问题。建议: 1、检查你的试剂有无污染; 2、操作有无问题(虽然可能性小,但有时很难想到的); 3、也可以换用其他方法,做个对照。 推荐一个快速的用NaI法噬菌体DNA提取的方法,是NEB公司噬菌体展示
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