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文献和实验第一代抗体—— 血清多克隆抗体(PcAb) 20世纪初期发现血清抗体和细菌毒素的作用,可用于多种疾病的治疗。多克隆抗体生产过程遇到免疫动物制备的血清抗体具有免疫原性和非均质性的特点,给抗体的研究和应用造成困难,但是由于血清多克隆抗体识别抗原的广谱性,以及识别不同表位的各种抗体或识别同种抗原表位的不同克隆的抗体可协同作用,因而能高效地识别抗原和阻断抗原对机体的危害,所以血清抗体至今仍为诊治疾病和生命科学研究重要制剂。 第二代抗体——单克隆抗体(McAb) 将经绵阳红细胞免疫后的小鼠
Polymer二抗进行了反应的放大,该方法敏感性较高,可缩短抗体孵育时间或降低抗体浓度。 (2)内源性过氧化物酶残余:适度延长内源性过氧化物酶阻断剂阻断时间。 (3)一抗导致的非特异性染色:多克隆抗体易于产生非特异性染色,结合抗体官网信息合理选择多克隆抗体或单克隆抗体。 (4)一抗种属来源与组织样本来源相同:如使用鼠源一抗检测小鼠组织,尽量选择种属来源与样本种属不同的一抗。 (5)切片或细胞过于干燥:实验过程中,需保持样本的湿润。 Q5:阳性染色细胞定位不正确,如何修正? (1)抗原修复条件不合理:尝试改变
制备多克隆抗体免疫动物的选择 由于抗原分子具有多种抗原决定簇,每一种决定簇可激活具有相应抗原受体的B细胞产生免疫应答,因而可产生多种针对不同抗原决定簇的抗体,这些由不同B细胞克隆产生的抗体称之为多克隆抗体。多克隆抗体的亲和力较一般单克隆抗体高,是其独特的优点。多克隆抗体的制备是一复杂的过程,为了制备高效价和高特异性的抗体,必须有理想的免疫原,挑选合适的动物和制定切实可行的免疫方案。 能作为免疫动物用的主要是哺乳类和禽类,其中常
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