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文献和实验体外哺乳类细胞(V79/HGPRT)基因突变试验- 中华仓鼠肺细胞染色体突变实验
受试物的致突变性。 3 材料和试剂 3.1 细胞:使用中国仓鼠肺(v79)细胞株。为了减少自发突变率,正式实验前先将野生型细胞群体中存在的自发HGPRT座位突变体选择性杀灭,方法是将野生型细胞接种于含次黄嘌呤及胸腺嘧啶,氨甲氨甲喋呤,甘氨酸的MEM培养液中培养1周,然后重新接种于MEM培养液中。 3.2 培养液:采用MEM(Eagle)基础培养液或DMEM培养液,补以10%小牛血清及适量抗菌素(青霉素,链霉素)。 3.3 磷酸缓冲液(无钙、镁PBS) 磷酸二氢钾
细胞 2.大鼠类 BRL 肝细胞 LW-3 肝细胞 BRL 3A 肝细胞 NRK 肾细胞 L-6TG 肌母细胞 3.仓鼠类 BHK 幼仓鼠肾 V79 中国仓鼠肺细胞 CHL 中国仓鼠肺细胞 CHO 中国仓鼠卵巢细胞 R1610 中国仓鼠体细胞 *CHO/dhFr- 二氢叶酸还原酶缺陷型CHO 4.人类 2BS 胚肺 XJH B淋巴细胞 HLF 胚肺 L-02 肝细胞
在体外培养的哺乳类动物的细胞,一般在数月中,经数十代的继代培养,则产生增殖危机(cris-is),即增殖能力显著降低,以至最后死亡,危机产生的时期,在小鼠、大鼠和仓鼠中都比较早,人胎儿二倍体成纤维细胞株可长达 50— 80代。对这样有限增殖的细胞株,通过反复更换培养液勉强加以维持,但其中部分细胞可产生变异重新获得增殖能力,成为可以继代培养的细胞,此称为确立继代细胞株(或称株化),而其细胞株则称确立细胞株。从过去沿袭下来的名称为细胞株。在建立细胞株时,常伴有染色体的变化,认为是基于广义
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