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- XKbio
- XK-XB-5022
- 国产/进口
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
129/Ola品系
- 细胞类型：
E14 小鼠胚胎干细胞
- 肿瘤类型：
E14 小鼠胚胎干细胞
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 库存：
16
- 英文名：
Mouse Embryonic Stem Cells ,ES-E14TG2a
- 生长状态：
球形克隆 贴壁生长
- 年限：
尽快解冻复苏细胞进行培养
- 运输方式：
快递形式
- 器官来源：
小鼠
- 是否是肿瘤细胞：
/
- 细胞形态：
球形克隆 贴壁生长
- 免疫类型：
E14 小鼠胚胎干细胞
- 物种来源：
E14 小鼠胚胎干细胞
- 相关疾病：
E14 小鼠胚胎干细胞
- 组织来源：
胚胎内细胞团
- 规格：
1x10^6
细胞介绍
小鼠胚胎干细胞。该细胞缺乏 HGPRT（HPRT），并且对 0.06 mM 的 6-硫鸟嘌呤有抗性。当在饲养层（胚胎成纤维细胞或 STO 细胞）上培养时，细胞保持未分化状态。在没有饲养层的情况下，细胞自发分化并形成胚胎结构。当注入胚泡中时，细胞可以进入生殖系。在常规的分子基因修饰技术之后，它们可用于重构小鼠胚胎。培养时需使用昆明白MEF作为饲养层细胞。
细胞特性：1） 来源：小鼠，129/Ola品系，胚胎内细胞团
2） 形态：球形克隆 贴壁生长
3） 含量：>1x10^6 细胞数
4） 规格：1mL冻存管包装
5） 用途：仅供科研使用
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：
取出25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀细胞用12ml完全培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，最后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm离心5min；
3）用适量的冻存液（基础培养基：FBS：DMSO=5:4:1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。
4、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中， 1500rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀用5ml完全培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。
E14 小鼠胚胎干细胞注意事项
产品使用
1)本产品仅能用于科研
2) 本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3)本产品未通过用于活体诊断的审核
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文献和实验李相运 邸科前，魏 巍 (1．河北农业大学动物科技学院，河北保定071001；2．北京大学生命科学学院，北京100871) 摘要：为了充分利用小鼠胚胎干(ES)细胞，就必须从众多小鼠品系中分离ES细胞系。本研究通过传统的成纤维细胞饲养层法，从CD一1、129／Sv、C57BL／6J和129／Sv X C57BL／6J四种不同遗传背景的小鼠中分离得到12个ES细胞系，而从KM小鼠没有得到ES细胞系。所有的ES细胞系都具有典型
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以下是根据NIH老年病研究所提供的英文的R1胚胎干细胞培养protocol整理而成。根据经验作部分修改。1、一般培养保持胚胎干细胞处于未分化状态培养基 细胞复苏 冻存细胞 明胶包被 细胞传代2 、体外分化培养基 包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板（使用或不使用盖玻片）体外分化方法注：以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系，其它胚胎干细胞的培养可以参考。不过人的胚胎干细胞培养不可以采用下面的protocol，需要用专用的protocol和培养
