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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
KU812 人外周血嗜碱性白血病细胞
- 细胞类型:
KU812 人外周血嗜碱性白血病细胞
- 肿瘤类型:
KU812 人外周血嗜碱性白血病细胞
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 库存:
11
- 英文名:
Human Peripheral Blood Basophil Leukemia Cells ,KU-812
- 生长状态:
骨髓细胞样,悬浮生长
- 年限:
尽快解冻复苏细胞进行培养
- 运输方式:
快递形式
- 器官来源:
外周血
- 是否是肿瘤细胞:
/
- 细胞形态:
骨髓细胞样,悬浮生长
- 免疫类型:
KU812 人外周血嗜碱性白血病细胞
- 物种来源:
KU812 人外周血嗜碱性白血病细胞
- 相关疾病:
KU812 人外周血嗜碱性白血病细胞
- 组织来源:
KU812 人外周血嗜碱性白血病细胞
- 规格:
1x10^6
细胞特性:
1) 来源:人外周血
2) 形态:骨髓细胞样,悬浮生长
3) 含量:>1x10^6 细胞数
4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途:仅供科研使用。
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出25cm2培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。

2、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。


3、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm离心5min;
3)用适量的冻存液(基础培养基:FBS:DMSO=5:4:1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。

4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中, 1500rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。

KU812 人外周血嗜碱性白血病细胞注意事项
产品使用
1)本产品仅能用于科研
2) 本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3)本产品未通过用于活体诊断的审核
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文献和实验人外周血单细胞悬液制备流程 1.采集人外周血样本于抗凝管中。 离心管内加入100 μL新鲜血和2 mL 1×红细胞裂解液,混匀,4℃裂解10 min。 300 g离心5 min(裂解完立即离心,防止时间过长损伤细胞),弃上清,得到白色细胞沉淀。 PBS洗涤一次。 加入100 μL细胞染色缓冲液重悬细胞,不用计数,即可进行后续流式抗体染色实验。按照100 μL新鲜血样本制备的单细胞悬液,加入1 Test对应的流式抗体混匀进行后续实验。 注意事项: 1. 采血用抗凝管,有肝素和EDTA两种
Jurkat细胞(人外周血白血病T细胞),是一种悬浮细胞。我的经验如下:1、培养液:RPMI1640,15%小牛血清,2%Na2CO3,1%HEPES,青霉素100IU/1ml,庆大霉素100IU/ml;2、培养条件:5%CO2,37度,30%湿度;3、细胞复苏:要快速将冻存管放入37度水中,不断轻轻摇晃,直到细胞完全溶解,加入10ml左右的培养液,800~1000rpm,10分钟离心,之后倒掉液体,加入新的培养基就可以进行培养了;4、细胞培养:起初进行传代时由于细胞刚刚复苏,长得比较
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