UDPG焦磷酸化酶/尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶试剂盒,微板法

UDPG焦磷酸化酶/尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶试剂盒,微板法

收藏
  • ¥2430 - 3950
  • wksubio
  • WS5350W
  • 国内
  • 2025年09月25日
    avatar
  • 企业认证

    点击 QQ 联系

    • 详细信息
    • 技术资料
    • 库存

      大量

    • 英文名

      UDPG Pyrophosphatase/Uridine Diphosphate Glucose Pyrophosphatase Kit

    • CAS号

      WS5350W

    • 保质期

      3个月

    • 供应商

      上海瓦兰生物

    • 保存条件

      4℃

    • 规格

      96T/48T

    规格:96T产品价格:¥3950.0
    规格:48T产品价格:¥2430.0
    本试剂盒仅供科研使用
    尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶UDP-glucose pyrophosphosp*prylaseUGP
    剂盒说明书
    (货号:WS5350W
    微板法 96 样)
    一、产品简介:
    UDPG 焦磷酸化酶(UGPEC 2.7.7.9)是碳水化合物代谢的重要指标之一,广泛
    分布于自然界中,在微生物及动植物的许多组织中都有存在。催化葡萄糖活化,将 1-
    磷酸葡萄糖与 UTP 分子合成为 UDP-葡萄糖(UDPG)。为各类碳水化合物包括蔗糖、
    葡聚糖、纤维素、半纤维素、果胶质、糖蛋白等的合成提供葡萄糖基。
    UGP 可逆催化反应生成 1 磷酸葡萄糖,在磷酸葡萄糖变位酶和 6-磷酸葡萄糖脱氢酶
    作用下将 NADP 转化为 NADPH340nm 的吸光值增加速率反映了 UGP 活性。
    二、试剂盒组成和配制:
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    提取液
    液体120mL×1
    4℃保存
    试剂一
    液体15mL×1
    4℃保存
    试剂二
    粉体×1
    -20℃保存
    临用前加1.1mL试剂一溶解,
    -20℃保存。
    试剂三
    粉体mg×1
    4℃保存
    临用前加 5.4mL 去离子水溶解。
    试剂四
    粉体mg×1
    4℃保存
    临用前加 5.4mL 去离子水溶解。
    三、所需的仪器和用品:
    酶标仪、96 孔板、可调式移液器、天平、低温离心机、研钵、蒸馏水。
    四、尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UGP)活性测定:
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
    样本和试剂浪费!
    1、样本制备:
    ① 组织样本:
    称取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.2g),加 1mL 提取液,进行冰浴匀浆,
    12000rpm4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
    【注】:也可按照组织质量(
    g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取。
    细胞样本:
    500 万细胞加入 1mL 提取液;超声波破碎细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声
    3s,间隔 10s,重复 30 次);12000rpm4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
    【注】:若增加样本量,可按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 1000~50001 的比例进行
    提取
    ③ 液体样品:直接检测。若浑浊,离心后取上清检测。
    2、上机检测:
    ① 酶标仪预热 30min,调节波长至 340nm,设定温度为 30℃。
    ② 在 96 孔板中依次加入:
    试剂名称(
    μL
    测定管
    样本
    10
    试剂一
    80
    试剂二
    10本试剂盒仅供科研使用
    2
    【注】1. ΔA 差值在零附近徘徊,可以延长反应时间 20min 后读取 A2,则相应的
    反应时间 T 则代入计算公式重新计算;
    或者加大样本上样量(如:由 10μL 增加到 20μL,则试剂一相应减少,保持
    总体积 200μL 不变),改变后的加样体积即 V1 代入计算公式重新计算;
    或者由 0.1g 样本取样量增加到 0.2g,加 1mL 的提取液研磨提取。
    2. 若上升趋势不稳定,可以每隔 10S 读取一次吸光值,选取一段线性
    上升的时间段来参与计算,相对应的 A1 A2 值也代入计算公式重新计算。
    五、结果计算:
    1、按照样本蛋白浓度计算
    酶活定义:每毫克组织蛋白每分钟消耗 1 nmol NADP 定义为一个酶活力单位。
    UGPnmol/min/mg prot)=[A÷(
    ε×d)×V2×109]÷(V1×Cpr)÷T
    =1607.8×A÷Cpr
    2)按照样本质量计算
    酶活定义:每克组织每分钟消耗 1 nmol NADP 定义为一个酶活力单位。
    UGPnmol/min /g 鲜重)=[A÷(
    ε×d)×V2×109]÷(W ×V1÷V)÷T
    =1607.8×A÷W
    3)按照细胞数量计算
    酶活定义:每 104 个细胞每分钟消耗 1 nmol NADP 定义为一个酶活力单位。
    UGPnmol/min /104 cell= [A÷(
    ε×d)×V2×109]÷(500×V1÷V) ÷T
    =3.2×A
    4)按照液体体积计算
    酶活定义:每毫升液体每分钟消耗 1 nmol NADP 定义为一个酶活力单位。
    UGPnmol/min /mL=[A÷(
    ε×d)×V2×109]÷V1÷T=1607.8×A
    ε---NADPH 摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm
    V---加入提取液体积,1mL
    V1---加入样本体积,0.01mL
    V2---反应体系总体积,2×10-4 L
    d---96 孔板光径,0.5cm
    T---反应时间,4min
    500---细胞总数,500 万;
    W---样本质量,g
    Cpr---样本蛋白质浓度,mg/mL;建议使用本公司的 BCA 蛋白含量检测试剂盒。
    试剂三
    50
    轻轻混匀30℃孵育 10min
    试剂四
    50
    轻轻混匀,反应开始,1min 时在 340nm 处读取吸光值 A1
    5min 时读取 A2,△A=A2-A1

    风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。

    同类产品报价

    产品名称
    产品价格
    公司名称
    报价日期
    ¥2470
    上海瓦兰生物科技有限公司
    2025年07月14日询价
    询价
    上海谷研实业有限公司
    2025年07月10日询价
    ¥1200
    上海机纯实业有限公司
    2025年07月13日询价
    ¥3000
    上海齐源生物科技有限公司
    2025年09月05日询价
    询价
    齐一生物科技(上海)有限公司
    2025年07月09日询价
    UDPG焦磷酸化酶/尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶试剂盒,微板法
    ¥2430 - 3950