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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
避光低温保存
- 保质期:
6个月
- 英文名:
淫羊藿PCR鉴定试剂盒
- 库存:
大量
- 供应商:
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 规格:
50次
产品及特点:
1. 即开即用,用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增淫羊藿,与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次,但只能用于科研。
6. 本产品由江蓝纯生物提供,不得用于临床诊断。
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(红盖) |
| 试剂二 | 超纯水 | 1 mL(亮黄色) |
| 试剂三 | 淫羊藿PCR鉴定引物混合液 | 100 μL(白盖) |
| 试剂四 | 淫羊藿PCR鉴定阳性对照(1×10E8/μL) | 50 μL(黄盖) |
| 试剂五 | 使用手册 | 1 份 |
低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂:
样品 DNA。
淫羊藿PCR鉴定试剂盒
使用方法
一、样品 DNA 的制备:
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品,则需要做N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加10μL淫羊藿PCR鉴定阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系):
3. 对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:
| 成份 | N+2 个样品管 | PCR 阴性对照 | PCR阳性对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20μL | 20μL | 20μL |
| 淫羊藿PCR鉴定引物混合液 | 各 2μL | 2μL | 2μL |
| N+2个样品DNA模板 | 各18μL | -- | -- |
| PCR 阴性对照(水) | -- | 18μL | -- |
| PCR 阳性对照(淫羊藿PCR鉴定阳性对照1000倍稀释液) | -- | -- | 18μL |
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR反应(35个循环) | 95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 7 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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文献和实验的,为此政府已建立了检测食品中转基因成分的体制。其中,最重要的是转基因检测方法的可靠性和有效性。所以我们利用分子生物学技术建立起一套基于PCR反应的实验方案,用于食品质控实验室的工作。最要害的是第一步:DNA提取,我们做了很严格的监控 。我们依据植物基因组和质粒DNA的提取效率来选择DNA提取试剂盒。整个提取过程包括破坏细胞壁、去除RNA和利用沉淀去除蛋白质,然后将DNA吸附在层析柱上,经过洗涤后再洗脱下来。类似的方法已经用于从其他一些植物和病毒中提取DNA。PCR反应的过程分为三个阶段:(1)通过加热
。 PCR扩增每个基因座的多态性区域是分析精子的第一步。两个基因座用两组引 物,同时引物必须位于多态性区域的边侧。当精子两个靶序列经PCR扩增,就确定了 每个基因座的等位基因成份。人工合成的寡核苷酸探针可识别等位基因小到仅发生单 个碱基置换的实验方法已得到改进,这些等位基因牧场划的寡聚物(ASO)探针第一 次应用是将人正常β珠蛋白基因中的正常βA等位基因与镰刀形红细胞(βA)的突变 区分开来。本方法检测等位基因需要人工合成的小片段寡核苷酸(典型的长19bp)。 每个寡核苷酸与一个等位
min左右后进行电泳。(3)溴化乙锭(EB)(10mg/ml):在20ml水中加入0.2g溴化乙锭,磁力搅拌数小时。然后用铝箔包裹容器或将溶液转移至棕色瓶中,室温保存。(4)加样缓冲液(Loading Buffer)一般为6×Loading Buffer二、电泳鉴定时注意事项:佩戴一次性手套,避免皮肤接触EB。无路做胶还是电泳缓冲液尽量用新的,不要超过两周。三、电泳步骤1、50×TAE取10ml稀释成500ml,取50ml溶解0.5g琼脂糖。电炉上煮沸后加入EB 5ul。另外450ml TAE倒入










