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- 过表达细胞株构建
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- 2025年07月09日
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百生跃
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细胞生物学实验
细胞是生命活动的基本结构和功能单位，细胞水平的实验技术手段在生命科学研究中充当了至关重要的角色。
百生跃生物搭建细胞生物学技术服务平台，可提供专业的细胞生物学实验技术服务以及细胞生物学类整体实验技术服务。拥有专业的细胞库房，目前库容各类细胞株，包括各类肿瘤细胞、耐药细胞株、原代细胞株等。
服务项目涵盖了从细胞培养、质粒转染，到细胞建模、样本收集，到细胞生物学功能检测整个科研流程，并可搭配分子生物学、慢病毒感染、蛋白组学、基因芯片、动物建模、免疫学等，实现课题项目的整体研发。
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文献和实验w_dennis 请教各位高人前辈，有做过基因的部分核苷酸缺失后，回补株构建实验吗？如何操作？ 请教下pBAD/gⅢ和pBR322质粒构建回补株的原理？叩谢！！:) woxingwosu 看看这个有没有帮助了： http://journal.shouxi.net/qikan/article.php?id=534304 w_dennis 谢谢，请问有pBAD/gⅢ和pBR
1）Flp-In系统 产生背景 随着新技术的不断革新，针对真核质粒转染构建稳定表达细胞株的方法也不断地创新，出现了TALEN、IOS、Cas9和Flp-In等技术，不断地提高稳定表达细胞株构建的成功率。 Flp-In系统——以其独特的优势，广泛应用于构建过表达或静默特定基因的稳定表达细胞株，用于特定基因的功能研究。Flp-In系统依据酿酒酵母的DNA重组系统的特点，高效构建稳定哺乳动物表达细胞株。这种DNA重组系统应用重组酶（Flp）和定点重组技术，将目的基因插入到哺乳动物指定的基因组中
1. 2 稳定转染细胞株的构建 原理： 稳定转染，就是转染的质粒DNA 整合到宿主细胞染色体上，使宿主细胞可 长期表达目的基因及蛋白。需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选或者应用高转染效率的病毒，根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物进行细胞传代，从而得到可稳定表达目的基因的细胞系。 应用： 观察目的基因及其表达蛋白在某种细胞中的功能（稳定，可长期进行研究） 一般流程：
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