- ￥2990
- 晶抗生物
- 国内
- JK-R10252
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
避光低温保存
- 保质期：
6个月
- 英文名：
根癌土壤杆菌PCR试剂盒
- 库存：
大量
- 供应商：
上海晶抗生物工程有限公司
- 规格：
50次
产品及特点：
1. 即开即用，用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增根癌土壤杆菌，与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次，但只能用于科研。
规格及成分：
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（红盖） |
| 试剂二 | 超纯水 | 1 mL（亮黄色） |
| 试剂三 | 根癌土壤杆菌PCR 引物混合液 | 100 μL（白盖） |
| 试剂四 | 根癌土壤杆菌PCR 阳性对照（1×10E/μL） | 50 μL（黄盖） |
| 试剂五 | 使用手册 | 1 份 |
低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：
样品 DNA。
根癌土壤杆菌PCR试剂盒
使用方法：
一、样品 DNA 的制备：
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品，则需要做N+2个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求的样品起始量）中加 10μL 根癌土壤杆菌PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置PCR反应(40 μL 体系)：
3. 对N+2个样品，在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照，故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分：
| 成份 | N+2 个样品管 | PCR 阴性对照 | PCR阳性对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20μL | 20μL | 20μL |
| 根癌土壤杆菌PCR 引物混合液 | 各2μL | 2μL | 2μL |
| N+2个样品DNA模板 | 各18μL | -- | -- |
| PCR 阴性对照（水） | -- | 18μL | -- |
| PCR 阳性对照（根癌土壤杆菌PCR阳性对照1000倍稀释液） | 18μL | 18μL | 18μL |
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR 反应35个循环 | 95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 7 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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文献和实验植物肿瘤根癌 opine 组织特异产生的一类化合物之总称。最早鉴定的是章鱼（肉）碱，后来又发现nopaline、agropin及agrocinopin。章鱼（肉）碱和nopaline是opine的精氨酸残基被鸟氨酸等置换所形成的化合物。agroc－inopin的整个结构还未确定，但已知是含糖磷酸酯的新型opine。这样opine中含有完全不同型的化合物，肿瘤组织究竟产生何种opine，是由根癌土壤杆菌（Agrobaterium tumefaciens）的肿瘤化因子Ti
植物肿瘤之一种。在多数双子叶植物和裸子植物以及少数单子叶植物中，由于土壤细菌根癌土壤杆菌（ Agrobacterium tumefaciens）的感染而发生。因在自然状态下是在根、茎的交界处（ crown）发生，故有此名。在人工接种下，也可在茎、叶等器官中发生。病原细菌从植物体的伤口侵入，在细胞间隙增殖，不侵入细胞内部，对肿瘤的诱导需要细菌，但对肿瘤的生长则不要求一定有细菌存在。在植物方面其伤口上形成的愈伤组织的细胞分裂，在肿瘤化上似乎是必要的。肿瘤的形状是由植物种类和病原
的转化方法 1 根癌农杆菌介导转化法 根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌。它能在自然条件下感染大多数双子叶植物的受伤部位，并诱导产生冠瘿瘤(crown gall tumor)。根癌农杆菌细胞中含有Ti 质粒(tumor-inducing plasmid，瘤诱导质粒)。在Ti 质粒上有一段T-DNA(T-DNA region)，即转移-DNA(transfer-DNA)，又称为T区(T region)。根癌农杆菌通过侵染
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