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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
避光低温保存
- 保质期:
6个月
- 英文名:
荚膜组织胞浆菌荚膜变种PCR试剂盒
- 库存:
大量
- 供应商:
上海晶抗生物工程有限公司
- 规格:
50次
产品及特点:
1. 即开即用,用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增荚膜组织胞浆菌荚膜变种,与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次,但只能用于科研。

规格及成分:
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(红盖) |
| 试剂二 | 超纯水 | 1 mL(亮黄色) |
| 试剂三 | 荚膜组织胞浆菌荚膜变种PCR 引物混合液 | 100 μL(白盖) |
| 试剂四 | 荚膜组织胞浆菌荚膜变种PCR 阳性对照(1×10E8 /μL) | 50 μL(黄盖) |
| 试剂五 | 使用手册 | 1 份 |
低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂:
样品DNA。
荚膜组织胞浆菌荚膜变种PCR试剂盒
使用方法:
一、样品 DNA 的制备:
1.用自选方法纯化N+2个样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒DNAout.
2.如果有N个样品,则需要做N+2个提取,包括-一个样品制备阳性对照和一一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加10μL荚膜组织胞浆菌荚膜变种PCR 阳性对照的1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提职结束后得到模板DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系):
3. 对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:
| 成份 | N+2 个样品管 | PCR 阴性对照 | PCR阳性对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20μL | 20μL | 20μL |
| 荚膜组织胞浆菌荚膜变种PCR 引物混合液 | 各2μL | 2μL | 2μL |
| N+2个样品DNA模板 | 各18μL | -- | -- |
| PCR 阴性对照(水) | -- | 18μL | -- |
| PCR 阳性对照(荚膜组织胞浆菌荚膜变种PCR阳性对照1000倍稀释液) | -- | -- | 18μL |
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR 反应35个循环 | 95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 7 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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文献和实验(一)医院感染常见的微生物 细菌、衣原体、支原体、病毒、真菌及寄生虫皆可引起医院感染。医院感染常见的微生物有: 1.细菌:葡萄球菌属、微球菌属、链球菌属、(包括A.B.C.D.G群及肺炎链球菌)、肠杆菌科、假单胞菌属、不动杆菌属、军团菌、脑膜炎败血性黄杆菌、结核分枝杆菌、非结核分枝杆菌、产单核细胞李斯特菌、类杆菌、产气荚膜梭菌、破伤风梭菌、核梭杆菌、丙酸杆菌、消化球菌等。 2.真菌:假丝酵母菌、组织胞浆菌、球孢子菌、隐球菌、曲霉菌等医`学教育网搜集整理。
(四)真菌感染研究 裸鼠用于真菌感染实验相当合适,特别是对新型隐球菌高度易感。1978年Graybill和Drutz在BALB/C和Swiss裸鼠上建立了新型隐球菌的致死性的感染。1979年Makoto、Miyaji等报告了经过组织病理学检查的裸鼠实验性隐性菌病,裸鼠的肝、脑、脾、淋巴结、肺和其他器官均有明显病变,又一次证明了细胞免疫在实验性隐球菌病中的作用。裸鼠作为宿主对抗真菌感染时的防御机制研究是很有用的。1978年Williams报告荚膜组织胞浆菌腹腔接种BALB/C
皮肤病学研究中实验动物的选择与应用--无胸腺裸鼠的选择与应用
真菌感染时的防御机制研究是很有用的。1978年Williams报告荚膜组织胞浆菌腹腔接种BALB/C裸鼠后,引起播散的致命感染,而杂合子鼠通常没有出现致命的感染,只有少量的荚膜组织胞浆菌繁殖生长。移植胸腺组织到裸鼠体内,可缩减严重的感染和减少大约50%的死亡率。他们提出裸鼠是荚膜组织胞浆菌感染研究有价值的模型。裸鼠的感染病包括使人遭受免疫损害的白色念珠菌感染,现已成为医学的重要研究课题。 (五)皮肤毒理学等研究 Reifenrath′s首先应用人类皮肤移植于裸鼠研究化学制剂通过人类皮肤










