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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
25
- 保质期:
有效期 12 个月
- 供应商:
上海帛科
- 保存条件:
避光-20℃储存
- 规格:
50T
| 名 称 | 规 格 |
| 2×SYBR qPCR MasterMix | 0.5mL×1管 |
| 荧光 PCR 专用模板稀释液 | 1mL×1 管 |
| 超纯水 | 1mL×1 管 |
| 染料法qPCR 引物混合液 | 100μL×1 管 |
| qPCR 阳性对照(1×10E7 拷贝/μL) | 50μL ×1 管 |
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 牛细小病毒(BPV)PCR检测试剂盒(荧光-PCR法) | 50T | BK-P63925 |
牛细小病毒(BPV)PCR检测试剂盒(荧光-PCR法)【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以 10E1-10E6 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的 DNA 片段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 4 号管中加入 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E4 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有 N 个样品,最好设置 N+2 个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 第 6 步所得的第 4 号稀释液(1×10E4 拷贝/μL)再加上一定量的水使总体积跟核酸纯化试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为 PC。另外用水作为 NC。
2.2核酸提取:核酸提取可以采用公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
| 革蜱探针法荧光定量PCR试剂盒 | 视黄醇脱氢酶8ELISA试剂盒 RDH8免费代测试剂 |
| 甲型H1N1(2009)/甲型流感病毒PCR检测试剂盒(荧光PCR法) | 抗麦角蛋白ELISA试剂盒 IgA免费代测试剂 |
| 马源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 | 大型多功能肽酶7ELISA试剂盒 |
| 无乳支原体探针法荧光定量PCR试剂盒 | 抗乳头状瘤病毒17型ELISA试剂盒 |
| 小蓟探针法PCR鉴定试剂盒 | 抗原提呈关联转运蛋白ELISA试剂盒 |
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| 钩端螺旋体通用PCR试剂盒 | 人锚蛋白B(Ank-B)试剂盒 ELISA |
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,引物经过优化,灵敏性高,分析灵敏度可以达到 100 拷贝/反应,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标高度保守区设计,不会跟其他生物的 DNA发生交叉反应,本产品足够 50 次 20μL 体系的染料法荧光定量 PCR 反应,既可用于定性,也可用于定量。用于定量时线性范围至少5个数量级。
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文献和实验,支原体DNA会显示为特异性条带,以此指示支原体的存在。PCR法可以检测大多数支原体,但谨慎起见最好同时使用另一种检测方法来进行验证。 普健生物生产的支原体PCR检测试剂盒(Mycoplasma PCR Test Kit)是一款具有快速、灵敏、特异性高等特点的支原体检测试剂盒,可用于细胞、培养基、动物血清等的支原体检测。本产品通过聚合酶链式反应技术(PCR)特异扩增支原体16s-rRNA 基因保守区域片段进行支原体检测,能够检测包括M. arthritidis, M
。目前被普遍使用的多种常规PCR方法如各种凝胶电泳PCR法,终点荧光定量法或PCR-ELISA法叫做终点PCR法。实时荧光定量PCR法最大的优点是克服了终点PCR法进入平台期或叫饱和期后定量的较大误差,实现DNA/RNA的精确定量。普通PCR技术发明于1983年,而实时荧光定量PCR技术发明于上世纪九十年代并于1996年生产出了世界上第一台实时荧光定量PCR仪,实时荧光定量PCR技术得以实现的技术要素主要有荧光定量PCR试剂盒和实时荧光定量PCR仪,我国荧光定量PCR试剂盒研发实力强大,生产厂家较多
加入荧光试剂,利用荧光信号实时检测PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR能够专一、灵敏、快速、高重复性地精确定量起始模板浓度。但是就成熟的microRNA而言,由于其是由21-25个核苷酸组成的小RNA,长度太短,并不能通过传统的实时定量PCR进行检测,但是通过特殊设计的茎环结构的反转录引物,配合实时定量PCR引物及探针可以精确检测微量样品中microRNA表达水平,也可以用终点PCR法定性检测。 图二 miRNA 实时荧光
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