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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
小鼠原代角质形成细胞
- 细胞类型:
小鼠原代角质形成细胞
- 肿瘤类型:
小鼠原代角质形成细胞
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 库存:
8
- 英文名:
Keratinocytes Cells
- 生长状态:
上皮样细胞,贴壁培养
- 年限:
尽快解冻复苏细胞进行培养
- 运输方式:
快递形式
- 器官来源:
小鼠原代角质形成细胞
- 是否是肿瘤细胞:
/
- 细胞形态:
上皮样细胞,贴壁培养
- 免疫类型:
小鼠原代角质形成细胞
- 物种来源:
小鼠原代角质形成细胞
- 相关疾病:
小鼠原代角质形成细胞
- 组织来源:
实验动物的正常皮肤组织
- 规格:
5*10^5
细胞详述
角质形成细胞是一种不断分化的复层鳞状上皮细胞,其分化的最终阶是形成角蛋白。根据角质形成细胞的发展阶段和特点,从内向外可将其分为五层。基底细胞层又称生发层,棘细胞层,颗粒层,透明层,角质层。
角质形成细胞的分化成熟表现为从基底层到向角质层的逐渐移行。在单一移行过程中,角质形成;细胞的形状和功能也逐渐发生着变化,从单层柱状上皮的基底层到扁平的细胞核消失的角质层。新生的基底细胞进入棘细胞层,然后上移到颗粒层的最上层。
细胞特性:1)细胞来源于实验动物的正常皮肤组织。
2)细胞鉴定:广谱角蛋白((Pan Cytokeratin)免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:上皮样细胞,贴壁培养。
产品的运输和保存
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出25cm2培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。

2、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。


3、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm离心5min;
3)用适量的冻存液(基础培养基:FBS:DMSO=5:4:1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。

4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中, 1500rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。

小鼠原代角质形成细胞注意事项
产品使用
1)本产品仅能用于科研
2) 本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3)本产品未通过用于活体诊断的审核
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验人皮肤角质形成细胞的分离与原代无血清培养.pdf
脊椎动物的皮肤表皮角质层的形成物。即指角质鳞片,羽毛、毛、爪、角、角齿等。通常,在鱼类、两栖类等水生生物或者近于水生动物中,角质形成物不够发达。
和眼科剪仔细分离皮肤和皮下组织,去除脂肪和疏松结缔组织。 2. 将皮肤展评,用手术刀切成2-3mm2的小片,放入中性蛋白酶消化液中,4℃下消化15-20h,或37℃下消化2-4h。 3. 用无菌针头和眼科镊子分离真皮与表皮。表皮薄而透明,真皮厚且轻微肿胀的凝胶状。 4. 将分离出的表皮块用0.25%胰蛋白酶,在37℃下振荡消化10-20min后,加入含10%胎牛血清的培养基终止消化。 5. 1500r/min分离心5min,吸去上清液,用培养液重新悬浮沉淀细胞,用吸管轻轻吹散细胞








