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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
47
- 保质期:
有效期 12 个月
- 供应商:
上海帛科
- 保存条件:
避光-20℃储存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 传染性皮下和造血器官坏死病病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | BKP6858 |
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,引物经过优化,灵敏性高,分析灵敏度可以达到 100 拷贝/反应,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标高度保守区设计,不会跟其他生物的 DNA发生交叉反应,本产品足够 50 次 20μL 体系的染料法荧光定量 PCR 反应,既可用于定性,也可用于定量。用于定量时线性范围至少5个数量级。
传染性皮下和造血器官坏死病病毒探针法荧光定量PCR试剂盒【试剂组成】
| 名 称 | 规 格 |
| 2×SYBR qPCR MasterMix | 0.5mL×1管 |
| 荧光 PCR 专用模板稀释液 | 1mL×1 管 |
| 超纯水 | 1mL×1 管 |
| 染料法qPCR 引物混合液 | 100μL×1 管 |
| qPCR 阳性对照(1×10E7 拷贝/μL) | 50μL ×1 管 |
传染性皮下和造血器官坏死病病毒探针法荧光定量PCR试剂盒【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以 10E1-10E6 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的 DNA 片段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 4 号管中加入 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E4 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有 N 个样品,最好设置 N+2 个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 第 6 步所得的第 4 号稀释液(1×10E4 拷贝/μL)再加上一定量的水使总体积跟核酸纯化试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为 PC。另外用水作为 NC。
2.2核酸提取:核酸提取可以采用公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
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文献和实验传染性皮下及造血组织坏死病毒(Infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus,IHHNV)属细小病毒科,病毒粒子直径约20纳米,单链DNA,该病毒感染外胚层组织,如鳃、表皮、前后肠上皮细胞、神经索和神经节,以及中胚层器官,如造血组织、触角腺、性腺、淋巴器官、结缔组织和横纹肌,在宿主细胞核内形成包涵体。对虾传染性皮下及造血组织坏死病,又名慢性矮小残缺综合征(runt-deformity syndrome,RDS),1981年在美国
荧光定量PCR的应用 分子生物学研究1、核酸定量分析。 对传染性疾病进行定量定性分析,病原微生物或病毒含量的检测 , 比如近期流行的甲型H1N1流感, 转基因动植物基因拷贝数的检测,RNAi 基因失活率的检测等。2 、基因表达差异分析。 比较经过不同处理样本之间特定基因的表达差异 ( 如药物处理、物理处理、化学处理等 ) ,特定基因在不同时相的表达差异以及cDNA芯片或差显结果的确证3 、SNP 检测。检测单核苷酸多态性对于研究个体对不同疾病的易感性或者个体
健康动物对各种刺激的耐受性一般比不健康、有病的动物要大,实验结果稳定,因此一定要选用健康动物进行实验,患有疾病或处于衰竭、饥饿、寒冷、炎热等条件下的动物,均会影响实验结果,选用的动物应没有该动物所特有的疾病,如小鼠的脱脚病(鼠痘)、病毒性肝炎和肺炎、伤寒;大鼠的沙门氏菌病、病毒性肺炎、化脓性中耳炎;豚鼠的维生素C缺乏症、传染性肺炎,沙门氏菌病;家兔的球虫病、巴氏杆菌病;狗的狂犬病、犬瘟热;猫的传染性白细胞减少症肺炎、猕猴的结核病,肺炎、痢疾等。常用实验动物的主要传染病的病原体、症状、病理所见
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