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尿素含量测定试剂盒(二乙酰一肟法),微板法

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  • ￥170
  • wksubio
  • WS1440W
  • 国内
  • 2026年01月13日
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    • 英文名：

      Urea content determination kit (diacetyl oxime method)

    • CAS号：

      WS1440W

    • 保质期：

      3个月

    • 供应商：

      上海瓦兰生物

    • 保存条件：

      4℃

    • 规格：

      96T

    本试剂盒仅供科研使用
    尿素含量（二乙酰一肟法）检测试剂盒说明书
    （货号：WS1440W 微板法 96 样）
    一、产品简介：
    在加热和强酸条件下，尿素与二乙酰一肟及安替比林反应呈黄色，在波长460 nm 处有特征吸收峰。通过检测
    生成的黄色物质在460nm处的增加量进而得出样本中尿素含量。
    二、试剂盒组分与配制：
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    试剂一
    液体 2mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂二
    粉体 mg×1 瓶
    4℃保存
    临用前甩几下使粉体落入底部，先加
    2.4mL 蒸馏水溶解，再缓慢加 2.4mL
    磷酸混匀，最后再加 4.8mL 硫酸混匀，
    冷却至室温备用。
    标准管
    粉体 mg×2 支
    4℃保存
    临 用 前 每 支 加 1mL 蒸 馏 水 溶 解
    （
    4mg/mL）， 再用蒸馏水稀释 40 倍
    （1:39）成 0.1mg/mL。
    三、所需仪器和用品：
    酶标仪、96 孔板、天平、移液器、离心机、蒸馏水。
    四、尿素含量检测：
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！
    1、样本制备：
    0.1g 组织样本，加 1mL 的蒸馏水研磨，超声萃取 10min 后定容至 1mL，室温静置 30min，12000rpm，常温
    离心 10min，上清液待测。
    2、上机检测：
    1 酶标仪预热 30min，设置温度在 37℃，设定波长到 460nm。
    2 做实验前选取 2 个样本，找出适合本次检测样本的稀释倍数 D。
    3 所有试剂解冻至室温，在 EP 管中依次加入：
    试剂名称（
    μL） 测定管
    对照管
    空白管
    （仅做一次）
    标准管
    （仅做一次）
    样本
    50
    50
    蒸馏水
    20
    50
    标准品
    50
    试剂一
    20
    20
    20
    试剂二
    40
    40
    40
    40
    混匀，95℃沸水浴反应 20min
    蒸馏水
    190
    190
    190
    190
    混匀，（若浑浊则 5000rpm 室温离心 5min 后取上清液测定）取 200μL
    至 96 孔板中，于 460nm 处读取吸光值 A，△A=A 测定-A 对照。
    【注】：测定管的 A 值若超过 1.5，可把样本再进行稀释，稀释倍数 D 代入计算公式。
    五、结果计算：
    1、按照组织质量计算：
    尿素含量(mg/g)=(C 标准×V1)×△A÷(A 标准-A 空白)÷(V1÷V×W)×D=0.1×△A÷(A 标准-A 空白)÷W×D
    尿素含量(mg/kg)=(C 标准×V1)×103×△A÷(A 标准-A 空白)÷(V1÷V×W)×D=100×△A÷(A 标准-A 空白)÷W×D
    C 标准---尿素标品浓度，0.1mg/mL；
    D---稀释倍数，未稀释即为 1； 60.04---尿素分子量；
    W---取样质量，g；
    V---提取液体积，1mL；
    V1---加入样本体积，0.05mL。

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