
原代细胞永生化服务
- ¥12000
- 技术简介 细胞永生化(Cell immortalization)是指体外培养的细胞经过自发的或受外界因素的影响从增殖衰老危机中逃离,从而具有无限增殖能力的过程。正常组织来源的细胞在通常的体外培养条件下可分裂生长,但经过有限次数的传代后,就会停止增殖,发生衰老和死亡。利用基因转染等技术将外源性永生化基因导入目的细胞内,从而建立永生化细胞株,以达到使体外培养的细胞具有无限增殖能力且细胞间无差异的目的。对细胞永生化进行深入研究,不仅有利于我们了解细胞增殖与衰老的分子机制,而且为探寻肿瘤治疗及器官移植的研究奠定了坚实的基础。此外,由于永生化细胞具有可以多次传代的特性,可以利用各种细胞永生化的方法使那些传代困难、增殖缓慢、容易衰老的细胞获得永生,从而为研究人员提供更多的细胞资源。由于体外培养细胞自发性永生化率非常低,目前普遍采用基因转染技术将外源性永生化基因导入目的细胞内, 以增加永生化。 实验方法 通过转入SV40基因,使p53,pRb功能失活,使细胞大量增殖,获得永生化。 永生化细胞的验证 a传代次数的验证(大于原代细胞传代次数即为永生化成功) b免疫荧光验证(永生化后标志性蛋白会丢失一些) c STR鉴定(证明永生化过程中细胞没有存在交叉污染)
- 上海
- 2026年03月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商:
上海澳音生物
- 服务名称:
原代细胞永生化服务
- 规格:
T25/冻存管
- 技术简介
细胞永生化(Cell immortalization)是指体外培养的细胞经过自发的或受外界因素的影响从增殖衰老危机中逃离,从而具有无限增殖能力的过程。正常组织来源的细胞在通常的体外培养条件下可分裂生长,但经过有限次数的传代后,就会停止增殖,发生衰老和死亡。利用基因转染等技术将外源性永生化基因导入目的细胞内,从而建立永生化细胞株,以达到使体外培养的细胞具有无限增殖能力且细胞间无差异的目的。对细胞永生化进行深入研究,不仅有利于我们了解细胞增殖与衰老的分子机制,而且为探寻肿瘤治疗及器官移植的研究奠定了坚实的基础。此外,由于永生化细胞具有可以多次传代的特性,可以利用各种细胞永生化的方法使那些传代困难、增殖缓慢、容易衰老的细胞获得永生,从而为研究人员提供更多的细胞资源。由于体外培养细胞自发性永生化率非常低,目前普遍采用基因转染技术将外源性永生化基因导入目的细胞内, 以增加永生化。
- 实验方法
通过转入SV40基因,使p53,pRb功能失活,使细胞大量增殖,获得永生化。
- 永生化细胞的验证
a传代次数的验证(大于原代细胞传代次数即为永生化成功)
b免疫荧光验证(永生化后标志性蛋白会丢失一些)
c STR鉴定(证明永生化过程中细胞没有存在交叉污染)


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文献和实验现象通常意味着细胞正在走向衰老或功能单一化,不再适合作为种子细胞进行扩增。尚恩的大鼠原代骨骼肌细胞、小鼠原代角质形成细胞等在培养中能更好地保持未分化状态,而友商产品则容易出现过早分化。 左:尚恩-大鼠原代骨骼肌细胞-P3-未肌管化 右:友商-大鼠原代骨骼肌细胞-P3-肌管化 左:尚恩-小鼠原代角质形成细胞-P2-未角质化 右:友商-小鼠原代角质形成细胞-P2-角质化 左:尚恩-小鼠原代神经干细胞-未特化
成分相近,它们可以聚集活体内源性 aSyn,使之在 S129 位点超磷酸化、泛素化、形成不溶性沉积,也就是可以模拟早期病理特征。 当把活性 aSyn PFFs 注射到啮齿动物脑中后也会有黑质纹状体病变特征,也就是疾病后期的运动损伤特征。 aSyn PFFs 模型具有其它模型的综合起来的各种优点,如可以模拟前期和后期病理特征,使研究预防性治疗方案成为可能,并且模型中 aSyn PFFs 的引入量并不像病毒载体模型那么高,而且该模型生成过程与实际人脑中发病情况也更相近,即诱发内源性 aSyn 聚集。 下两图分别为原代
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