土壤α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶（S-α-Afa）活性试剂盒,微板法产品图

土壤α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶（S-α-Afa）活性试剂盒,微

板法
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  • ￥1850
  • wksubio
  • WS5430W
  • 国内
  • 2026年10月05日
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    • 英文名：

      soil α- L-arabiofuranosidase (S- α- Afa Active Reagent Kit

    • CAS号：

      WS5430W

    • 保质期：

      3个月

    • 供应商：

      上海瓦兰生物

    • 保存条件：

      4℃

    • 规格：

      48T

    本试剂盒仅供科研使用
    土壤α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶（S-α-Afa）活性测定试剂盒说明书
    (货号:WS5430W 微板法 48 样)
    一、产品简介：
    土壤α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶（S-α-Afa，EC 3.2.1.55）是一种能够水解非还原呋喃阿拉
    伯糖残基的糖苷酶类。
    本试剂盒提供一种简单，灵敏，快速的测定方法，S-α-Afa分解对-硝*苯阿拉伯呋喃
    糖苷生成对-硝基*酚（PNP），后者在405nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率即
    可得出α-Afa酶活性大小。
    二、试剂盒组分与配制：
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    试剂一
    液体 40mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂二
    粉剂 mg×1 瓶
    4℃保存
    临用前甩几下使粉剂落入底部，再
    加 15.5mL 试剂一，充分溶解备用。
    试剂三
    液体 20mL×1 瓶
    4℃保存
    标准品
    粉剂 mg×1 支
    4℃保存
    若重新做标曲，则用到该试剂
    三、所需的仪器和用品：
    酶标仪、96 孔板、台式离心机、恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、蒸馏水。
    四、土壤α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶（S-α-Afa）活性测定：
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
    样本和试剂浪费！
    1、样本制备：
    取新鲜土样或者 37 度烘箱风干（需先粗研磨），过 40 目筛网，备用。
    2、上机检测：
    ① 酶标仪预热 30 min，调节波长到 405 nm。
    ② 在离心管中依次加入下列试剂：
    【注】：1. 若 A 测定超过 1.8，可对最后一步的待检测上清液(测定管和对照管)同时进行稀释（用水稀释即
    可），稀释倍数 D 代入计算公式；
    2.若ΔA 过小，可以增加土样量或延长保温时间（如：2h 或更长），重新调整的样本量 W 和反应
    时间 T 需代入计算公式重新计算。
    3. 若同时检测同一背景下的土壤样本，此批土壤样本可做一个样本自身对照，节省时间；若是不
    试剂名称（
    μL）
    测定管
    对照管
    土壤（
    g）
    0.1g
    0.1g
    试剂一
    300
    试剂二
    300
    迅速混匀，37℃保温 1h（间隔 15min 振荡混匀一次）
    试剂三
    200
    200
    混匀，12000rpm，离心 5min，立即取上清液 200μL
    于 96 孔板中，立即于 405nm 下读取吸光值 A，△A= A
    测定- A 对照（每个样本需做一个自身对照）。本试剂盒仅供科研使用
    2
    同背景下的土壤样本（如黑土，红土，黄土等），则每个样本需做一个自身对照，即按照说
    明书加样表操作即可，
    五、结果计算：
    1、标准曲线：y = 0.1292x - 0.0128；x 是标准品 PNP 质量（
    μg）， y 是△A。
    2、活性定义：在 37℃，每小时每克土壤产生 1μg 对-硝基*酚（PNP）定义为 1 个酶活单位。
    S-α-Afa(μg/h/g 土样)=[(△A+0.0128)÷0.1292]÷W÷T×D=7.74×(△A+0.0128)÷W×D
    W---土壤样品质量，g；
    D---稀释倍数，未稀释即为 1；
    T---催化反应时间，1 h；
    PNP 相对分子质量---139.11。
    附：标准曲线制作过程：
    1 制备标准品母液（1mg/mL）：向标准品 EP 管里面加入 1ml 蒸馏水溶解，若有结晶
    析出，需 37℃水浴至完全溶解。
    2 把母液稀释成以下浓度梯度的标准品：0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1 mg/mL。也可根据实际
    样本来调整标准品浓度。
    3 在 EP 管中直接加入：10μL 标准品+290μL 试剂一+200μL 试剂三，混匀，立即取上
    清液 200μL 于 96 孔板中，立即于 405nm 下读取吸光值 A。
    4 根据结果制作标准曲线。

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