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土壤α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(S-α-Afa)活性试剂盒,微

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  • ¥1850
  • wksubio
  • WS5430W
  • 国内
  • 2026年01月30日
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    • 英文名

      soil α- L-arabiofuranosidase (S- α- Afa Active Reagent Kit

    • CAS号

      WS5430W

    • 保质期

      3个月

    • 供应商

      上海瓦兰生物

    • 保存条件

      4℃

    • 规格

      48T

    本试剂盒仅供科研使用
    土壤α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(S-α-Afa)活性测定试剂盒说明书
    (货号:WS5430W 微板法 48 )
    一、产品简介:
    土壤α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(S-α-AfaEC 3.2.1.55)是一种能够水解非还原呋喃阿拉
    伯糖残基的糖苷酶类。
    本试剂盒提供一种简单,灵敏,快速的测定方法,S-α-Afa分解对-硝*苯阿拉伯呋喃
    糖苷生成对-硝基*酚(PNP),后者在405nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率即
    可得出α-Afa酶活性大小。
    二、试剂盒组分与配制:
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    试剂一
    液体 40mL×1
    4℃保存
    试剂二
    粉剂 mg×1
    4℃保存
    临用前甩几下使粉剂落入底部,再
    15.5mL 试剂一,充分溶解备用。
    试剂三
    液体 20mL×1
    4℃保存
    标准品
    粉剂 mg×1
    4℃保存
    若重新做标曲,则用到该试剂
    三、所需的仪器和用品:
    酶标仪、96 孔板、台式离心机、恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、蒸馏水。
    四、土壤α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(S-α-Afa)活性测定:
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
    样本和试剂浪费!
    1、样本制备:
    取新鲜土样或者 37 度烘箱风干(需先粗研磨),过 40 目筛网,备用。
    2、上机检测
    ① 酶标仪预热 30 min,调节波长到 405 nm
    ② 在离心管中依次加入下列试剂:
    【注】:1. A 测定超过 1.8,可对最后一步的待检测上清液(测定管和对照管)同时进行稀释(用水稀释即
    可),稀释倍数 D 代入计算公式;
    2.ΔA 过小,可以增加土样量或延长保温时间(如:2h 或更长),重新调整的样本量 W 和反应
    时间 T 需代入计算公式重新计算。
    3. 若同时检测同一背景下的土壤样本,此批土壤样本可做一个样本自身对照,节省时间;若是不
    试剂名称(
    μL
    测定管
    对照管
    土壤(
    g
    0.1g
    0.1g
    试剂一
    300
    试剂二
    300
    迅速混匀,37℃保温 1h(间隔 15min 振荡混匀一次)
    试剂三
    200
    200
    混匀,12000rpm,离心 5min立即取上清液 200μL
    96 孔板中,立即405nm 下读取吸光值 AA= A
    测定- A 对照(每个样本需做一个自身对照)。本试剂盒仅供科研使用
    2
    同背景下的土壤样本(如黑土,红土,黄土等),则每个样本需做一个自身对照,即按照说
    明书加样表操作即可,
    五、结果计算:
    1、标准曲线:y = 0.1292x - 0.0128x 是标准品 PNP 质量(
    μg), y A
    2、活性定义:在 37℃,每小时每克土壤产生 1μg -硝基*酚(PNP)定义为 1 个酶活单位。
    S-α-Afa(μg/h/g 土样)=[(A+0.0128)÷0.1292]÷W÷T×D=7.74×(A+0.0128)÷W×D
    W---土壤样品质量,g
    D---稀释倍数,未稀释即为 1
    T---催化反应时间,1 h
    PNP 相对分子质量---139.11
    附:标准曲线制作过程:
    1 制备标准品母液(1mg/mL):向标准品 EP 管里面加入 1ml 蒸馏水溶解,若有结晶
    析出,需 37℃水浴至完全溶解。
    2 把母液稀释成以下浓度梯度的标准品:0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1 mg/mL。也可根据实际
    样本来调整标准品浓度。
    3 EP 管中直接加入:10μL 标准品+290μL 试剂一+200μL 试剂三,混匀,立即取上
    清液 200μL 96 孔板中,立即于 405nm 下读取吸光值 A
    4 根据结果制作标准曲线。

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