相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
soil α- L-arabiofuranosidase (S- α- Afa Active Reagent Kit
- CAS号:
WS5430W
- 保质期:
3个月
- 供应商:
上海瓦兰生物
- 保存条件:
4℃
- 规格:
48T
本试剂盒仅供科研使用
土壤α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(S-α-Afa)活性测定试剂盒说明书
(货号:WS5430W 微板法 48 样)
一、产品简介:
土壤α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(S-α-Afa,EC 3.2.1.55)是一种能够水解非还原呋喃阿拉
伯糖残基的糖苷酶类。
本试剂盒提供一种简单,灵敏,快速的测定方法,S-α-Afa分解对-硝*苯阿拉伯呋喃
糖苷生成对-硝基*酚(PNP),后者在405nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率即
可得出α-Afa酶活性大小。
二、试剂盒组分与配制:
试剂名称
规格
保存要求
备注
试剂一
液体 40mL×1 瓶
4℃保存
试剂二
粉剂 mg×1 瓶
4℃保存
临用前甩几下使粉剂落入底部,再
加 15.5mL 试剂一,充分溶解备用。
试剂三
液体 20mL×1 瓶
4℃保存
标准品
粉剂 mg×1 支
4℃保存
若重新做标曲,则用到该试剂
三、所需的仪器和用品:
酶标仪、96 孔板、台式离心机、恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、蒸馏水。
四、土壤α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(S-α-Afa)活性测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备:
取新鲜土样或者 37 度烘箱风干(需先粗研磨),过 40 目筛网,备用。
2、上机检测:
① 酶标仪预热 30 min,调节波长到 405 nm。
② 在离心管中依次加入下列试剂:
【注】:1. 若 A 测定超过 1.8,可对最后一步的待检测上清液(测定管和对照管)同时进行稀释(用水稀释即
可),稀释倍数 D 代入计算公式;
2.若ΔA 过小,可以增加土样量或延长保温时间(如:2h 或更长),重新调整的样本量 W 和反应
时间 T 需代入计算公式重新计算。
3. 若同时检测同一背景下的土壤样本,此批土壤样本可做一个样本自身对照,节省时间;若是不
试剂名称(
μL)
测定管
对照管
土壤(
g)
0.1g
0.1g
试剂一
300
试剂二
300
迅速混匀,37℃保温 1h(间隔 15min 振荡混匀一次)
试剂三
200
200
混匀,12000rpm,离心 5min,立即取上清液 200μL
于 96 孔板中,立即于 405nm 下读取吸光值 A,△A= A
测定- A 对照(每个样本需做一个自身对照)。本试剂盒仅供科研使用
2
同背景下的土壤样本(如黑土,红土,黄土等),则每个样本需做一个自身对照,即按照说
明书加样表操作即可,
五、结果计算:
1、标准曲线:y = 0.1292x - 0.0128;x 是标准品 PNP 质量(
μg), y 是△A。
2、活性定义:在 37℃,每小时每克土壤产生 1μg 对-硝基*酚(PNP)定义为 1 个酶活单位。
S-α-Afa(μg/h/g 土样)=[(△A+0.0128)÷0.1292]÷W÷T×D=7.74×(△A+0.0128)÷W×D
W---土壤样品质量,g;
D---稀释倍数,未稀释即为 1;
T---催化反应时间,1 h;
PNP 相对分子质量---139.11。
附:标准曲线制作过程:
1 制备标准品母液(1mg/mL):向标准品 EP 管里面加入 1ml 蒸馏水溶解,若有结晶
析出,需 37℃水浴至完全溶解。
2 把母液稀释成以下浓度梯度的标准品:0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1 mg/mL。也可根据实际
样本来调整标准品浓度。
3 在 EP 管中直接加入:10μL 标准品+290μL 试剂一+200μL 试剂三,混匀,立即取上
清液 200μL 于 96 孔板中,立即于 405nm 下读取吸光值 A。
4 根据结果制作标准曲线。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
土壤α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(S-α-Afa)活性试剂盒,微板法
¥1850










