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- 2025年07月10日
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- 服务名称：
线粒体形态学检测
- 提供商：
XSL
线粒体是细胞生成ATP的主要地点，是促进细胞能量转换、参与细胞凋亡的重要细胞器。
检测手段透射电镜
实验步骤
1. 取小于1立方毫米的组织；
2. 用2.5%戊.二.醛（磷酸缓冲液配制）固定2小时，0.1M的磷酸缓冲液漂洗3次×15 min；
3. 用1%锇酸固定液固定2小时，0.1M的磷酸缓冲液漂洗3次×15 min；
4. 梯度乙醇进行脱水，4℃进行；
5. 包埋：使用纯.丙.酮+包埋液（2:1）室温处理4小时，纯.丙.酮+包埋液（1:2）室温过夜，纯包埋液37℃处理3小时；
6. ⑦超薄切片机切片，厚度在50 nm左右；
7. 用3%醋酸铀-枸橼酸铅双染色；
8. 透射电镜观察，拍片。
结果展示
结果分析：
右图为左图红色框内部位放大。可见肌原纤维(Mf)结构完整、清晰可见 ； Z线(ZL)清晰；线粒体(M)分布正常，形态正常，线粒体膜完整，线粒体内嵴清晰，排列整齐。
实验周期及交付标准
1. 实验周期：1个月左右
2. 交付标准：透射电镜图片、病理报告、实验报告（实验步骤、试剂、仪器等）
需确认的信息
1. 样本的种属及类型（组织还是细胞）
2. 样本的数量
3. 拍照要求以及分析要求
收费标准/服务周期/提供结果：
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文献和实验1 光学显微镜和倒置显微镜 （1） 未染色细胞：凋亡细胞的体积变小、变形，细胞膜完整但出现发泡现象，细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。 （2） 染色细胞：常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化，核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态。 2 荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜 一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。 常用的DNA特异性染料有：HO 33342
一、线粒体膜电位检测原理 线粒体膜电位下降是细胞凋亡早期的标志性事件，发生在细胞核凋亡特征（染色质浓缩、DNA断裂）出现之前，一旦线粒体膜电位崩溃，细胞凋亡便不可逆转。 JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位∆Ψm的理想荧光探针，可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。JC-1有单体和多聚体两种存在状态，两者发射光谱不同。在正常细胞内，线粒体膜电位较高，JC-1聚集在线粒体的基质中，形成聚合物，可产生红色荧光；凋亡早期，线粒体膜电位降低，JC-1不能聚集在线粒体基质中，此时JC-1为单体
Estimating Mitochondrial Mass，可以用于线粒体肿胀的检测 Accurate measurements of mitochondrial mass require a probe that will accumulate in mitochondria regardless of the mitochondrial membrane potential, a property displayed
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