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XSL
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存活曲线测定
测定细胞的存活曲线
实验原理: 细细胞存活数据一般绘制成存活分率vs.剂量的对数图
实验材料:
试剂:MTT(BIOSHARP, Amresco 0793)、DMSO(SIGMA、D2650)
仪器:超净工作台、CO2培养箱、生物倒置显微镜、酶标仪
实验内容与方法:
1.消化对数生长期细胞,稀释细胞悬液,接种于6孔细胞培养板;
2.加入受试样品,分别于1d、2d、3d、4d、5d、6d、7d、8d、9d、10d消化收集细胞,计数;
3.绘制生长曲线。
实验信息
(客户提供): 生长状况良好的细胞株,并提供细胞特性,培养条件及相关注意事项。 服务周期:2周 注意事项:
客户提供:
1、提供新鲜的肝素或者EDTA抗凝的外周血;
2、提供新鲜的培养细胞,提供新鲜组织,需要实验室制备成单细胞悬液。
交付标准:完整项目报告(材料、试剂、仪器、方法、数据分析、实验结果)
收费标准/服务周期/提供结果:
欢迎咨询详谈,我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。
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文献和实验以存活数量的对数值为纵坐标,以年龄为横坐标作图,从而把每一个种群的死亡——存活情况绘成一条曲线,这条曲线即是存活曲线。 存活曲线的基本类型: Ι型 (凹型) :生命早期有极高的死亡率,但是一旦活到某一年龄,死亡率就变得很低而且稳定,如鱼类、很多无脊椎动物等。 Π型 (直线型):种群各年龄的死亡基本相同,如水螅。小型哺乳动物、鸟类的成年阶段等。 Ш型(凸型):绝大多数个体都能活到生理年龄,早期死亡率极低 ,但一旦达到一定生理年龄时,短期内几乎全部死亡,如人类、盘羊
以存活数为纵坐标,以年龄为横坐标而画成的曲线,可反映种群的死亡过程。有三种基本类型(如图):A型,凸型存活曲线,表示种群在接近生理寿命前只有很少个体死亡,即绝大多数个体能达到生理寿命。近代人的存活曲线属此类型。B型,对角线型存活曲线,表示种群在各年龄期的死亡率相等,如许多鸟类的存活曲线接近B型。C型,凹型存活曲线,表示幼体死亡率很高,以后的死亡率低而稳定。如牡蛎的存活曲线就接近此型,在自由游泳的幼体期,其死亡率很高,找到固着基底后,死亡率便低。
紫石榴 最近在研究心肌缺血对某microRNA的调控,有文献报道在原代细胞中随时间下调,我用的是H9c2心肌细胞系做的,想做个验证,顺便找最佳干预点。考虑经费问题,所以先用RT-PCR的方法做趋势,再上real time。我是提取总RNA,定量后(量和纯度都还好),用过茎环引物逆转录,再PCR电泳的,但做出的结果与设想趋势不符,且重复性很差,不知道哪里不对。麻烦高手指导下。 版主zhujoker留言: RT-PCR这种半定量是不可
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