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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
说明书
- 细胞类型:
肿瘤细胞
- 肿瘤类型:
肺癌细胞
- 供应商:
帛科
- 库存:
32
- 英文名:
A549 [A-549]
- 生长状态:
贴壁细胞
- 运输方式:
免费快递
- 器官来源:
肺癌
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 免疫类型:
说明书
- 物种来源:
人
- 相关疾病:
说明书
- 组织来源:
肺癌
- 规格:
1×10⁶cells/T25培养瓶
产品名称:A549 [A-549](人非小细胞肺癌细胞)
英文名称:A549 [A-549]
货号:BK-X63225
规格:1×10⁶cells/T25培养瓶
商品详情:
A549 [A-549](人非小细胞肺癌细胞)(STR鉴定正确)
别称 A 549; A549; NCI-A549; A549/ATCC; A549 ATCC; A549ATCC; hA549
种属 人
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
生长培养基 Ham's F-12K+10% FBS+1% P/S
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
温度:37℃
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2~3次/周
背景描述 A549细胞是由D·J·Griad通过肺癌组织移植培养建系,源自于一位58岁白人男性;A549能通过胞苷二磷酸胆碱途径合成含有高含量不饱和脂肪酸的卵磷脂。
年龄(性别) 男;58岁
组织来源 肺癌
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 肺癌细胞
生物安全等级 1
倍增时间 ~22 hours
保藏机构 ATCC; CCL-185 ATCC; CRM-CCL-185 ATCC; CRL-7909BCRC; 60074 BCRJ; 0033 DSMZ; ACC-107 ECACC; 86012804
可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式
(1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;
(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
(3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。
细胞用途:仅供科研使用。
细胞接收后的处理:
1) 收到细胞后,请检查发货培养瓶的状况,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2) 在显微镜下确认细胞生长状态时,最好在低倍镜(4或5X物镜)下进行,能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下,同时给刚收到的细胞拍照,(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。
3) 观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h。
4) 贴壁细胞:在运输过程中贴壁细胞会有脱落的现象,如发现贴壁细胞有脱落或者脱落后抱团生长,可将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和未贴壁细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到加有按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基的原培养瓶中(或新的培养瓶中)。
5) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
细胞培养操作规范:
主要功能:
(1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
(3)与血管疾病的进展和稳定有关。
生理变化:
(1)主动脉硬化。
(2)主动脉瘤
(3)主动脉钙化。
基本特性:
(1)组织来源于正常大鼠大动脉组织。
(2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。
(3)原代细胞培养末期液氮冻存。
(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5)肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
人多发性骨髓瘤细胞(带荧光)细胞数量:1*10^6
人乳腺癌细胞(荧光素酶)组织来源:腺癌,乳腺,胸水
人肾母细胞瘤细胞细胞数量:1*10^6
云南宣威肺腺癌细胞系组织来源:肝癌
人肾透明细胞癌细胞组织来源:器官:肾 疾病:肾透明细胞腺癌
SD大鼠脂肪干细胞(RFP)细胞数量:1*10^6
A549 [A-549](人非小细胞肺癌细胞)人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA试剂盒Human Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅰ, TNFsR-ⅠElisa Kit
人转化生长因子β1(TGF-β1)试剂盒ELISAHuman Transforming Growth factor β1, TGF-β1
人转化生长因子α(TGF-α)ELISA检测试剂盒Human transforming growth factor α, TGF-α
人基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)elisa试剂盒Human Stromal cell derived factor 1β, SDF-1β
人干细胞因子受体(SCFR)试剂盒elisaHuman Stem Cell Factor Receptor, SCFR
人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)检测试剂盒elisaHuman Stem cell factor/mast cell growth factor, SCF/MGF
人可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA试剂盒Human Soluble Cluster of differentiation 40 ligand, sCD40L
人可溶性CD30配体(sCD30L)试剂盒ELISAHuman Soluble Cluster of differentiation 30 ligand, sCD30L
人正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA检测试剂盒Human regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted, RANTES
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基,90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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文献和实验问: A549细胞到底是如何形态?我见过三角形,近乎MDCK细胞形态的,还有的呈长梭形。我感觉自己的细胞好像混进了MDCK细胞。大家帮忙诊断一下,谢谢。 我培养的A549细胞 答1:
我也在养A549细胞,也来讲讲自己的经验,希望大家共同学习。我们主要是看细胞的密度,大概有80-90%铺满培养瓶底就可以传代了,时间长短不一,大概有5-7天吧,一瓶一般传3-4瓶,中间一般会有一次换液的。培养基用的是1640+10%的小牛血清+200u/ml庆大霉素。传代时先倒掉就培养基,然后用PBS洗一两次,然后再用0.25%胰酶消化(100ml培养瓶盖住表面大概要两滴管左右),可镜经下观察细胞间已出现细胞胞质回缩变圆,缝隙变大(我的细胞大概要2min左右),即可倒去消化液,加入培养基,吹打细胞
我养了三种贴壁的细胞,用同样的消化方法,都很好。这三种细胞是A549,ECV304,2BS。1、0.25%胰酶新鲜解冻,不需要预热。2、倒掉培养瓶中的培养基,并用预冷的D-Hank‘s洗两次(要冷,用前4度中取出)。3、加入约1-2ml的胰酶,晃动瓶子,使液体浸润瓶底。4、超净台上放置约1-2分钟(2BS需要的时间更短,约1分钟)5、镜下观察(我一般都省略了,因为每次的效果都很好),见细胞变圆或细胞间隙变大,即可加入含血清的培养基终止消化。(我们的胰酶都不去掉)6、从瓶口到瓶底吹打,可见细胞
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