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Fluo 4-AM;钙荧光探针

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    • 英文名

      Fluo 4-AM

    • CAS号

      273221-67-3

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    • 供应商

      贝万塔生物

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    Fluo-4是一种将Fluo-3结构中的Cl替换成F的钙荧光探针。由于将Cl替换
    成了电子吸引力更强的F,它的最大激发波长会向短波长处偏离10nm左右。这
    个波长更接近于氩激光器的波长,所以用氩激光器激发时,Fluo-4的荧光强度比
    Fluo-3强一倍。
    Fluo-4,AM穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-4,从而被
    滞留在细胞内,Fluo-4若以游离配体形式存在时几乎是非荧光性的,但是当它与
    细胞内钙离子结合后可以产生较强的荧光,最大激发波长为494nm,最大发射波
    长为516nm。可以使用激光共聚焦显微镜或流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度的
    变化。

    1试剂
    2mMFluo-4,AM/DMSO(将1mgFluo-4,AM溶于442µLDMSO
    PluronicF127
    Hanks•balancedsaltsolutionHBSS
    HEPESbuffersaline10mMHEPES1mMNa2HPO4137mMNaCl5mMKCl
    1mMCaCl20.5mMMgCl25mMglucose0.1%BSApH7.4
    2操作
    .Fluo-4,AM/DMSO溶液中加入16.5mgPluronicF127PluronicF127可以
    防止Fluo-4,AMHBSS中聚合并能帮助其进入细胞。
    .HBSS稀释Fluo-4,AM溶液,制备4µMFluo-4,AM工作液。
    .Fluo-4,AM工作液加入细胞,在37℃培养20分钟。
    .加入5倍体积的含有1%胎牛血清的HBSS,再继续培养40分钟。
    .HEPESbuffersaline洗涤细胞3次,然后用HEPESbuffersaline使细胞重
    悬浮,制成1×105cells/mL的溶液。
    .37℃下培养10分钟,然后用该细胞进行荧光钙离子检测。激发波长494nm
    发射波长516nm
    *标记的条件因细胞种类而异,在每次实验前,请先确定最佳条件。以上方法仅
    供参考。
    储存条件-20℃干燥避光保存,

    上海贝万塔生物科技有限公司专业提供科研试剂产品,主要包括高端化学试剂、生物学试剂、分析标准品、对照品、标准物质等,应用覆盖药物分析领域、食品安全领域、聚合物研究领域、环境监测领域,客户广泛分布于食品、制药、政府机构、第三方检测、环境测试机构、化工、科研院校、生物工程等行业。 上海贝万塔生物科技拥有充满活力的团队,持续创新,致力于为客户提供高质量产品和优质的服务。 我司代理多种进口品牌,包括但不限于以下品牌:EP;USP;BP;JP;TRC;LGC;中检院;Clearsynth;CIL;CDN;Alsachim;IsoScienses;Omicron;Medical Isotopes;Witega;DRE;Wellington;Accustandard;Inorganic Venture;CPAchem;Reagecon;O2si;Lardon;Nu-chek;Avanti;Matreya;CaroteNature;PhytoLab;ChromaDex;Extrasynthese;Oligo-tech;TDB;IsoSep;Iduron;Dextra;Ludger;Magsphere;NIST;ERM;;Spherotech;Phosphorex;Polysciences;Nanocs;Norgen;MCE;Fitzgerald;R&D;Omega;Enzo;TakaRa;Abnova;jackson;Mabtch;Biosensis;PeproTech;ENZO;WAKO;赛默飞;ChemService;AOCS;sigma;chiron;PSS;TCI等

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    Fluo-4是一种将Fluo-3结构中的Cl替换成F的钙荧光探针。由于将Cl替换
    成了电子吸引力更强的F,它的最大激发波长会向短波长处偏离10nm左右。这
    个波长更接近于氩激光器的波长,所以用氩激光器激发时,Fluo-4的荧光强度比
    Fluo-3强一倍。
    Fluo-4,AM穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-4,从而被
    滞留在细胞内,Fluo-4若以游离配体形式存在时几乎是非荧光性的,但是当它与
    细胞内钙离子结合后可以产生较强的荧光,最大激发波长为494nm,最大发射波
    长为516nm。可以使用激光共聚焦显微镜或流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度的
    变化。

    1试剂
    2mMFluo-4,AM/DMSO(将1mgFluo-4,AM溶于442µLDMSO
    PluronicF127
    Hanks•balancedsaltsolutionHBSS
    HEPESbuffersaline10mMHEPES1mMNa2HPO4137mMNaCl5mMKCl
    1mMCaCl20.5mMMgCl25mMglucose0.1%BSApH7.4
    2操作
    .Fluo-4,AM/DMSO溶液中加入16.5mgPluronicF127PluronicF127可以
    防止Fluo-4,AMHBSS中聚合并能帮助其进入细胞。
    .HBSS稀释Fluo-4,AM溶液,制备4µMFluo-4,AM工作液。
    .Fluo-4,AM工作液加入细胞,在37℃培养20分钟。
    .加入5倍体积的含有1%胎牛血清的HBSS,再继续培养40分钟。
    .HEPESbuffersaline洗涤细胞3次,然后用HEPESbuffersaline使细胞重
    悬浮,制成1×105cells/mL的溶液。
    .37℃下培养10分钟,然后用该细胞进行荧光钙离子检测。激发波长494nm
    发射波长516nm
    *标记的条件因细胞种类而异,在每次实验前,请先确定最佳条件。以上方法仅
    供参考。
    储存条件-20℃干燥避光保存,

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