- ￥3870 - 22680
- 派瑞曼
- P-Db2357
- 国产
- 2025年07月11日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
54
- 英文名：
Recombinant Human Nucleoside-diphosphate kinase
- 保质期：
说明书
- 供应商：
上海博湖
- 保存条件：
-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution
- 规格：
50μg/200ug/1mg
| 规格： | 50μg | 产品价格： | ￥3870.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 200ug | 产品价格： | ￥7200.0 |
| 规格： | 1mg | 产品价格： | ￥22680.0 |
| 产品名称 | Recombinant Human Nucleoside-diphosphate kinase |
| 货号 | P-Db2357 |
| 规格 | 50μg, 200μg, 1mg |
| 种属 | Human |
| 宿主 | Yeast |
| 表达区间 | 1-228 |
| 分子量 | 25 kDa |
| 标签 | N-terminal His Tag |
| 纯度 | Greater than 95% as determined by SDS-PAGE |
| 应用 | Western Blot, ELISA |
| 性状 | Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4 |
| 溶解方法 | Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex |
| 存储 | -20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution |
| 别名 | CMK, CMPK, CMPK 1, cmpk1, Cytidine monophosphate (UMP CMP) kinase 1 cytosolic, Cytidine monophosphate kinase, Cytidine monophosphate UMP CMP kinase 1 cytosolic, Cytidylate kinase, dCMP kinase, Deoxycytidylate kinase, EC 2.7.4.14, KCY, KCY_HUMAN |
1.培养500ml哺乳动物细胞，然后将重组质粒转染到细胞中，通过瞬时表达产生目标蛋白。
2.收集含有目标蛋白的部分（细胞或培养上清）。
3.通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。
4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。
5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。
交付内容：纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签（Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达90%以上。
特点：
Recombinant Human Nucleoside-diphosphate kinase生物素标记：生物素标记反应简单、温和且很少抑制抗体活性，将生物素与抗体共价结合是一种非常简便、直接的标记方法。
酶标记：酶标记抗体是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成，其应用范围非常广泛，结果即时可见、敏感性高。
荧光标记：荧光基团AbFluorTM是新型的荧光标记物之一，产品覆盖350-770nm。不同的AbFluor基团经恰当的激光可发光， 从而得知抗体的定位和待测抗原的分布情况，主要用于细胞分选或高分辨率免疫染色，是一种非常好的亚细胞水平定位的方法。
公司正在销售的产品：
CD209 Protein Human 重组人 DC-SIGN / CD209 蛋白 (Fc 标签)
PP2Ac 蛋酸酶4(抗原 0.5mgPP2Ac 蛋酸酶4(抗原)
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TGFBR1 Protein Human 重组人 TGFBR1 / ALK-5 / SKR4 蛋白 (aa 200-503, His & GST 标签)
PROCR Protein Mouse 重组小鼠 Epcr / PROCR 蛋白 (Fc 标签)
操作步骤：
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。
2． 每100mg固体组织置于培养皿中，手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；
3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；
4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；
2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。
4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：
| 细胞数量 | Lysis Buffer加入量 |
| 107个 | 0.5 mL～1 mL |
| 5×106个 | 0.2 mL～0.5 mL |
6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
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