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Human KGF/FGF-7 ELISA Kit

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  • ¥1250 - 1750
  • 威奥生物已认证
  • 详见说明书
  • 上海
  • 2025年12月15日
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    • 详细信息
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      1

    • 供应商

      威奥生物

    • 检测范围

      详见说明书

    • 检测方法

      夹心法

    • 应用

      科研

    • 适应物种

    • 标记物

      详见说明书

    • 样本

      血清/ 血浆/ 细胞培养上清/组织匀浆/其它生物体液

    • 规格

      48T/96T

    规格:48T产品价格:¥1250.0
    规格:96T产品价格:¥1750.0
    威奥生物生产的ELISA试剂盒采用“夹心法”:将捕获抗体包被于酶标板上,捕获样品及标准品中的靶蛋白,生物素化的检测抗体与靶蛋白结合, SABC复合物与生物素化检测抗体结合,形成免疫复合物,加入TMB显色液后,若反应孔中有靶蛋白则显蓝色,加入终止液变黄色,检测过程中游离的成分均被洗去,用酶标仪在498 nm处测OD值,靶蛋白浓度与OD值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出标本中靶蛋白的浓度。
    品质高:凭借多年的生物试剂盒研发经验,提供高灵敏度、高特异性的ELISA检测试剂盒; 技术精:技术服务人员拥有丰富的操作经验和精湛的技术,严格操作,保证高效、精准地完成检测; 服务全:根据客户实验要求设计、制定实验方案,同时为客户提供专业的数据分析服务; 价格低:以优惠的价格为客户提供最全面的服务,


    产品细节图片1
    Human KGF/FGF-7 ELISA Kit
     

    检测原理:

    威奥生物生产的ELISA 试剂盒采用“夹心法”:将捕获抗体包被于酶标板上,捕获样品及标准品中的靶蛋白,生物素化的检测抗体与靶蛋白结合, SABC 复合物与生物素化检测抗体结合,形成免疫复合物,加入 TMB显色液后,若反应孔中有靶蛋白则显蓝色,加入终止液变黄色,检测过程中游离的成分均被洗去,用酶标仪在 450 nm 处测OD 值,靶蛋白浓度与OD 值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出标本中靶蛋白的浓度。
    试剂盒组分: 保存温度 4℃)

     
    规格(48 T 规格(96 T
    预包被酶标板 8×6  8×12 
    标准 1  1 
    标准品/样品稀释液 10ml 15ml
    生物素化检测抗体100× 1  1 
    生物素化检测抗体稀释液 6ml 12ml
    SABC 复合 6ml 12ml
    TMB 显色液A/B) 3ml 6ml
    终止 6ml 12ml
    20×浓缩洗涤液 30ml 60ml
    封板胶 2  4 
    产品说明书 1  1 
    本试剂盒适用于血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清及其它生物体液
    标本收集与试剂准备:
    1. 血清、血浆样本收集应使用一次性的无热原,无内毒素试管EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝均可,血清、血浆避免使用溶血,高血脂标本,标本悬浮物应离心去除,使标本清澈透明。待测样本应尽早检测,2-8℃保存 48 小时;更长时间须冷冻(-20℃或-80℃)保存,避免反复冻融。
    2. 洗涤液配置:用蒸馏水 1:20 稀释(例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的蒸馏水
    3. 标准品配制:取 8  1.5ml 离心管,分别标注 S1,S2,S3,S4,S5,S6S7,blank,第一管 S1 中加入标准品/样品稀释液 900ul,第二至第八管中分别加入标准品/样品稀释液 200ul,在第一管中加入(20000pg/ml)标准品溶液 100ul 置于漩涡混合器上混匀后用加样器吸出 200ul,移至第二管,如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出 200ul 弃去,第八管为空白对照。标准曲线浓度为:2000100050025012562.531.250 pg/ml标准品的用量及标准曲线范围也可根据自己需要配置)。

    产品细节图片2
     
    1. 生物素化抗体工作液配置:使用前 20 分钟,用生物素化抗体稀释液将 100×生物素化抗体稀释成 工作液,根据所需用量配置,当日使用,剩余弃之。
     
    1. TMB 显色液的配置:使用前 10 分钟,将 TMB 显色液 A 液和 B  1:1 混合,避光放置备用。
    2. 如果您检测的样本中靶蛋白浓度高于标准品最高值,建议重新检测,请根据实际情况,适当倍数稀释(建议做预实验,以确定稀释倍数)。

    检测程序:

    1. 加样:空白孔加入 50μl 标准品/样品稀释液,其余孔各加入标准品或待测样品 50ul,将反应板混匀后置 37℃, 40 分钟。
    2. 洗板:用 洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,每孔加入 洗液 350μl,每次震荡/浸泡 1-2 分钟,向滤纸上印干。
    3. 空白孔加入 100ul 生物素化抗体稀释液,其余孔各加入 1×的生物素化抗体工作液 100ul,混匀后置 37℃,30分钟。
    4. 洗板:同上。
    5. 每孔加入 SABC 复合物工作液 100ul,混匀后置 37℃,20 分钟。
    6. 洗板:同上。
    7. 每孔加入提前配置好的 TMB 混合液 100ul,混匀后置 37 ℃暗处反应 10-20 分钟(具体显色时间根据显色结果而定)。
    8. 每孔加入 100ul 终止液,混匀,30 分钟内用酶标仪在 450nm 处测吸光值。

    结果判断与计算:

    1. 所有 OD 值建议减除空白孔值后再进行计算,如空白孔 OD 低于 0.1,也可以直接计算。
    2. 以标准品浓度作横坐标,OD 值作纵坐标,手工绘制或用软件绘制标准曲线,根据样品 OD 值计算出相应含量,再乘以稀释倍数即可。

    试剂盒性能:

    1 灵敏度:可测浓度小于 6.25pg/ml
    2、 特异性:同时可检测重组或天然的人 KGF/FGF-7  ,不与人其它细胞因子有交叉反应。
    3、 重复性:板内,板间变异系数均小于 10%。

    注意事项

    1. 在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测,每次检测都应做标准曲线。
    2. 洗涤过程很关键,洗涤不充分将导致精确度误差及 OD 值错误地升高,从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,37℃水浴使结晶完全溶解后再配制洗涤液。
    3. 检测时所有试剂都要恢复到室温,板条开封后剩余板条需封好,放回袋中 1   个月内用完。
    4. 试剂盒使用超敏 TMB  溶液,显色过深时会出现沉淀状,属正常现象,混匀即可,不影响结果判读
    5. 说明书以试剂盒内纸质版为准,本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断!

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