土壤纤维素酶(S-CL)/内切-β-1,4葡聚糖酶试剂盒

土壤纤维素酶(S-CL)/内切-β-1,4葡聚糖酶试剂盒

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  • ¥600 - 1020
  • wksubio
  • WS8030F
  • 国内
  • 2025年12月23日
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    • 英文名

      Soil Cellulase (S-CL)/Endonuclease- β- 1,4 Glucan enzyme kit

    • CAS号

      WS8030F

    • 保质期

      3个月

    • 供应商

      上海瓦兰生物

    • 保存条件

      4℃

    • 规格

      24T/48T

    规格:24T产品价格:¥600.0
    规格:48T产品价格:¥1020.0
    本试剂盒仅供科研使用
    土壤纤维素酶(Solid-cellulaseS-CL)活性测定试剂盒说明书
    (货号:WS8030F 分光法 48 )
    一、产品简介:
    纤维素是植物残体进入土壤的碳水化合物的重要组分之一。在土壤纤维素酶作用下,可
    以催化纤维素水解生成纤维二糖、葡萄糖等还原糖,所以,纤维素酶是碳素循环中的一个
    重要酶。本试剂盒采用3,5-二硝基水杨酸与终产物还原糖反应生成棕红色物质,在540nm
    处有特征吸收峰,进而得到土壤纤维素酶活性。
    二、试剂盒组分与配制:
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    试剂一
    粉体 mg×1
    4℃保存
    临用前加入 60mL 试剂二,可
    80℃水浴,搅拌至溶解,待用。
    试剂二
    液体 120mL×1
    4℃保存
    试剂三
    液体 30mL×1
    4℃保存
    标准品
    粉剂 mg×1
    4℃保存
    若重新做标曲,则用到该试剂。
    三、所需仪器和用品:
    可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、水浴锅或恒温振荡培养箱、可调式移
    液器、蒸馏水。
    四、土壤纤维素酶(S-CL)活性测定:
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
    样本和试剂浪费!
    1、样本制备:
    取新鲜土样或干土(风干或者 37 度烘箱风干),先粗研磨,过 40 目筛网备用。
    【注】:土壤风干,可减少土壤中水分对于实验的干扰;土壤过筛,保证取样的均匀细腻;
    2、上机检测:
    ① 培养:在 EP 管依次加入:
    试剂名称(
    μL
    测定管
    对照管
    土样(
    g
    0.3-0.5
    0.3-0.5
    试剂一
    1000
    试剂二
    1000
    充分混匀,40℃培养 24 小时(振荡培养或间隔一段时间手动振
    荡混匀几下),12000rpm25℃离心 10min,上清液待用
    ② 分光光度计预热 30min 以上,调节波长为 540nm,蒸馏水调零。
    ③ 显色反应:在 EP 管中依次加入:
    上清液
    400
    400
    试剂三
    300
    300
    混匀,95℃水浴 5min,待冷却后,全部转移到 1mL 玻璃比色皿(光
    1cm)中,在 540nm 处读取吸光值 AA=A 测定管-A 对照管。
    【注】:1.ΔA 较小,可延长 40℃的孵育时间 T(如 48 小时或更长),或增加土样质
    W。则改变后的 V1 或土壤重量 W 需代入计算公式重新计算。
    2.若测定管 A 值大于 1.8 A 大于 1歩显色反应步骤中的上清液可用蒸馏
    水稀释,则稀释倍数 D 代入公式计算。本试剂盒仅供科研使用
    2
    五、结果计算:
    1、标准曲线方程:y = 8.3553x - 0.0094x 为标准品质量(mg),y A
    2、单位定义:每天每克土样中产生 1μg 还原糖定义为一个酶活力单位。
    土壤纤维素酶(S-CL)活力(μg/d/g 土样)=[(ΔA+0.0094)÷8.3553×103×(V÷V1)]÷W÷T
    =299.2×(ΔA+0.0094) ÷W
    V---反应总体积,1000μL
    V1---显色反应中上清液体积,400μL
    T---反应时间,24h=1d
    W---土壤样本实际取样量,g
    附:标准曲线制作过程:
    1 制备标准品母液(
    1mg/mL):从标准品管中称量取出 2mg 至一新 EP 管中,再加 2mL
    蒸馏水混匀溶解即 1mg/mL 的标准品(母液需在两天内用且-20℃保存)。
    2 把母液用蒸馏水稀释成六个浓度梯度的标准品:0, 0.18, 0.21, 0.24, 0.27, 0.3. mg/mL
    也可根据实际样本来调整标准品浓度。
    3 在显色反应阶段,按照测定管加样表操作,依据结果即可制作标准曲线。

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