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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
/
- 保质期:
3个月
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
详见说明书
- 规格:
50管/48样
分光光度法50管/48样
注 意 :正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
类胡萝卜素是一种脂溶性且具有营养特性的化合物,给植物和动物提供天然色素,是重要的抗氧化剂,并有能力转换为必需维生素。类胡萝卜素可预防细胞,组织和基因损毁,增强身体免疫系统,抵御感染,减少癌症风险,保护心脏。
测定原理:
样品通过混合有机溶剂萃取,类胡萝卜素与非类胡萝卜素成分分离,在448nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器:
天平、烘箱,100目筛、三角瓶或烧杯、漏斗,纱布、玻璃试管、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、正己烷
试剂组成和配制:
试剂一:液体100mL×3瓶,4℃保存。
试剂二:液体100mL×1瓶。4℃保存。
试剂三:液体80mL×1瓶。4℃保存。
试剂四:自备。(正己烷)
样本处理:
提取:称取0.5g样本,加入1.5mL试剂一 ,冰浴匀浆,超声破萃取15min(可改用振荡金属浴),15000g 25℃离心5min,取上层液转入10mL离心管中,沉淀用1.5mL试剂一重复提取2次,并将上层液并入上述10mL离心管中作为提取出的非皂化类胡萝卜素样品。
皂化:向上述非皂化类胡萝卜素样品中加入2mL试剂二,混匀,25℃室温避光皂化过夜,皂化完成后,加入3mL试剂三,混匀后,5000g 25℃离心5min,将上层类胡萝卜素提取相转入5mL离心管,用正己烷定容到5mL,置冰上待测。
测定操作表:
| 空白管 | 测定管 | |
| 样本(μL) | 1000 | |
| 正己烷(μL) | 1000 | |
| 于1mL玻璃比色皿,迅速测定450nm处吸光值A,分别记为A空白管和A测定管,△A=A测定管-A空白管 | ||
计算公式:
类胡萝卜素含量(μg/g鲜重)= △A×V样总÷(ε×d)÷W
= 31.25×△A÷W
V样总:提取液总体积,5mL;ε:类胡萝卜素消光系数,0.16;d:比色皿光径,1cm; W:样本质量,g
注意事项:
- 提取液易挥发,有毒性,操作时做好防护措施。
- 测定必须能迅速,防止挥发造成误差。
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文献和实验灭活剂,可防止生物的光灭活和光破坏。细菌的类胡萝卜素( baterial carotenoid),有菌酯色素、β -胡萝卜素、γ -胡萝卜素和玉米黄素等,此外特别值得重视的是从具有光合成的红色硫黄细菌和红色无硫黄细菌中所取得的螺菌黄素( spirilloxanthin)、球形(红极毛杆菌)酮( spheroidenone)、 okenone,以及绿色硫黄细菌中含有的绿菌烯( chlorobactene)等。
指在黄载色体和红载色体中含有类胡萝卜素的球状小泡。和蝶呤体( pterinosome)一起与出现黄色、橙色和红色有关。直径多在 0.1微米左右,但也有在 1微米以上的。所含有的类胡萝卜素系来源于食物。
吸收峰。据此所测得的吸光度值代人不同的经验公式(见结果计算),计算出叶绿体色素丙酮(或乙醇)提取液中叶绿素 a 和 b 的浓度及其叶绿素总浓度和类胡萝卜素的总浓度,并依据所使用的单位植物组织(鲜重、干重或面积),求算出色素的含量。 [ 实验目的 ] 掌握分光光度法对植物叶绿体色素提取液中叶绿素 a 和 b 的浓度及其叶绿素总浓度和类胡萝卜素的总浓度测定与计算方法,以及植物材料中各种色素含量的求算方法。 [ 器材和试剂 ] 1 .植物材料 新鲜(或烘干)植物叶片,如菠菜叶片等。 2 .实验











