- ￥35 - 150
- 经科
- JK-2327
- 国产
- 2026年10月23日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量现货
- 英文名：
SDS-PAGE Sample Loading Buffer
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海经科化学科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
2*1ml/10ml
| 规格： | 2*1ml | 产品价格： | ￥35.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 10ml | 产品价格： | ￥150.0 |
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(SDS-PAGE Sample Loading Buffer,5X),是一种经过改良的以溴酚蓝为染料,5倍浓缩的蛋白上样缓冲液。 可以用于常规的SDS-PAGE蛋白样品的上样。
使用说明：
1、在室温或不超过37 ℃的水浴中溶解SDS-PAGE上样缓冲液(5X)。 水浴溶解后立即室温存放,尽量避免长时间置于水浴中。
2、按照每4 ul蛋白样品加入1 ul蛋白上样缓冲液(5X)的比例,混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液(5X)。
3、100 ℃或沸水浴加热5-10分钟,以充分变性蛋白。
4、冷却到室温后,直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。
5、通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。
保存条件：
-20 ℃保存,一年有效。
注意事项：
1、SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)中含少量DTT,有轻微刺激性气味,但不含剧毒的巯基乙醇。
2、SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)必须完全溶解后再使用。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(SDS-PAGE Sample Loading Buffer,5X),是一种经过改良的以溴酚蓝为染料,5倍浓缩的蛋白上样缓冲液。
器上）2 小时。3. 4 ℃ 下在微型离心机中以 16000 × g 离心 20 分钟。轻轻地从离心机中取出离心管，置于冰上。将上清液转移至放置在冰上的新离心管中。弃去沉淀。二、样品制备1. 取出小部分 (50 μL) 裂解物，用于蛋白分析。确定每种细胞裂解物的蛋白浓度。2. 向剩余体积的细胞裂解物中加入等体积的 2× Laemmli 样品缓冲液。我们推荐采用以下方法来还原样品和使样品变性，除非在线抗体数据表指明应使用非还原和非变性条件。3. 还原和变性：在 100 ℃ 下将样品缓冲液中的每种细胞裂解物煮沸
2～4 h，使抗体与 protein A 琼脂糖珠偶连； 免疫沉淀反应后，在 4 ℃ 以 3 000 rpm 速度离心 3 min，将琼脂糖珠离心至管底；将上清小心吸去，琼脂糖珠用 1 ml 裂解缓冲液洗 3～4 次；最后加入 15 μl 的 2 × SDS 上样缓冲液，沸水煮 5 分钟； SDS-PAGE，Western blotting 或质谱仪分析。 四、通过免疫共沉淀确定结合蛋白 用磷酸盐缓冲液洗 30 块 10 cm 培养板上的适宜
或 4℃过夜以捕获免疫沉淀复合物。 离心（3000 rpm，5 min）收集 Agarose 珠子，弃掉上清，用 800 µL-1000µL 预冷的 PBS 缓冲液洗涤珠子 3 次。（小心吸取上清，避免触碰底部珠子） 收集沉淀，加 60 µL 2×SDS 蛋白上样缓冲液中重悬沉淀，轻混均匀后煮沸 5 min，12000 rpm 离心 10 min。 将上清转移至一新离心管，进行 Western 检测。
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