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- XY-sh0206
- 上海
- 2026年01月06日
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100
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/
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3个月
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件：
详见说明书
- 规格：
50管/48样
分光光度法50管/48样
注 意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
硝态氮是植物最主要的氮源。植物体内硝态氮含量反映了土壤中硝态氮的供应情况，可作为土壤氮肥的指标。测定植物体内的硝态氮含量，不仅能够反映出植物的氮素营养情况，而且对鉴定蔬菜和以植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。
测定原理：
在浓酸条件下，NO3-与水杨酸反应，生成硝基水杨酸，硝基水杨酸在碱性条件下（PH>12）呈黄色，在一定范围内，其颜色深浅与含量成正比，可比色测定计算得硝态氮含量。
自备实验用品及仪器：
蒸馏水、天平、常温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、恒温水浴锅。
试剂组成和配制：
试剂一：粉剂×2瓶，4℃避光保存。临用前根据用量每瓶加2mL浓硫酸充分溶解。
试剂二：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1支，4℃保存。
样本处理：
按照质量（g）：蒸馏水体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL蒸馏水）加入蒸馏水，室温匀浆后置于90℃恒温水浴锅中浸提30min，期间不断晃动或者置于90℃恒温摇床中振荡提取30min，待冷却后于25℃，12000g离心15min，取上清待测。（深色植物匀浆后加入约3mg试剂三后再提取）
测定操作表：
| 空白管 | 测定管 | |
| 样本（μL） | 30 | |
| 蒸馏水（μL） | 30 | |
| 试剂一（μL） | 60 | 60 |
| 充分混匀，25℃静置30min | ||
| 试剂二（μL） | 1425 | 1425 |
| 混匀，涡旋振荡，使出现的沉淀充分溶解，取1mL于1mL玻璃比色皿中测定410nm处吸光值A，△A=A测定管-A空白管 | ||
计算公式：
标准曲线：y=0.0156x+0.0073，R2=0.9997
NO3—— N含量（mg/kg鲜重）=（△A-0.0073）÷ 0.0156÷（W÷V样总）
=64.1×（△A-0.0073）÷W
V样总：加入提取液体积，1mL，W：样本质量，g
注意事项：
- 试剂一配制好后尽快使用，4℃可保存一周。
- 试剂一和试剂二均具有强腐蚀性，操作时需做好防护措施。
- 最低检出限为2μg/g。
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文献和实验【原理】硝酸还原酶（NR）是植物氮素同化的关键酶，它催化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸盐： 产生的亚硝酸盐与对–氨基苯磺酸（或对–氨基苯磺酰胺）及α–萘胺（或萘基乙烯二胺）在酸性条件下定量生成红色偶氮化合物。其反应如下：生成的红色偶氮化合物在540nm波长下有最大吸收峰，可用分光光度法测定。硝酸还原酶活性可由产生的亚硝态氮的量表示。一般以Nμg·g﹣1·h﹣1为单位。NR的测定可分为活体法和离体法。活体法步骤简单，适合快速、多组测定。离体法复杂，但重复性较好。【仪器与用具】分光光度计；真空抽气
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一、原理 硝酸还原酶（NR）是植物氮素同化的关键酶，它催化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸盐,产生的亚硝酸盐与对�氨基苯磺酸（或对�氨基苯磺酰胺）及α�萘胺（或萘基乙烯二胺）在酸性条件下定量生成红色偶氮化合物。其反应如下： 生成的红色偶氮化合物在540nm波长下有最大吸收峰，可用分光光度法测定。硝酸还原酶活性可由产生的亚硝态氮的量表示。一般以Nμg・g-1 ・h-1 为单位。NR的测定可分为活体法和离体法。活体法步骤简单，适合快速、多组测定。离体法复杂
