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植物硝态氮测试盒(微量法)

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  • XY-sh0205
  • 上海
  • 2026年01月06日
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      100

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    • 保质期

      3个月

    • 供应商

      上海烜雅生物科技有限公司

    • 保存条件

      详见说明书

    • 规格

      100管/96样

    植物硝态氮试剂盒说明书
                                           微量法100T/96S


        意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
    测定意义:
    硝态氮是植物最主要的氮源。植物体内硝态氮含量反映了土壤中硝态氮的供应情况,可作为土壤氮肥的指标。测定植物体内的硝态氮含量,不仅能够反映出植物的氮素营养情况,而且对鉴定蔬菜和以植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。

    测定原理
    在浓酸条件下,NO3-与水杨酸反应,生成硝基水杨酸,硝基水杨酸在碱性条件下(PH>12)呈黄色,在一定范围内,其颜色深浅与含量成正比,可比色测定计算得硝态氮含量
    自备实验用品及仪器
    蒸馏水、天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。   

    试剂组成和配制
    试剂一:粉剂×2支,4℃避光保存。临用前根据用量每瓶加1.2mL浓硫酸充分溶解。
    试剂二:液体60mL×1瓶,4℃保存。
    试剂三:粉剂×1支,4℃保存。

    样本处理
    按照质量(g):蒸馏水体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL蒸馏水)加入蒸馏水,室温匀浆后置于90℃恒温水浴锅中浸提30min,期间不断晃动或者置于90℃恒温摇床中振荡提取30min,待冷却后于25℃,12000g离心15min,取上清待测。(深色植物匀浆后加入约3mg试剂三后再提取)

    测定操作表
    分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至410nm,蒸馏水调零。
    1. EP管中如下表加样
      空白管 测定管
    样本(μL)   10
    蒸馏水(μL) 10  
    试剂一(μL) 20 20
    充分混匀,25℃静置30min
    试剂二(μL) 475 475
    混匀,涡旋振荡,使出现的沉淀充分溶解,转移200uL至微量石英比色皿/96孔板中测定410nm处吸光值A,△A=A测定管-A空白管
    注意:空白管只需测定一次。

    计算公式

    a.    用微量石英比色皿测定的计算公式如下
    标准曲线:y=0.0156x+0.0073,R2=0.9997
    NO3 N含量(mg/kg鲜重)=A-0.0073÷ 0.0156÷(W÷V样总)
                    =64.1×A-0.0073÷W
    V样总:加入提取液体积,1mL,W:样本质量,g
    1. 96孔板测定的计算公式如下
    标准曲线:y=0.0078x+0.0073,R2=0.9997
    NO3 N(mg/kg鲜重)=A-0.0073÷ 0.0078÷(W÷V样总)
                    =128.2×A-0.0073÷W
    V样总:加入提取液体积,1mL,W:样本质量,g

    注意事项
    1. 试剂一配制好后尽快使用,4℃可保存一周。
    2. 试剂一和试剂二均具有强腐蚀性,操作时需做好防护措施。
    3. 最低检出限为2μg/g。
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