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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Plant Root Activity Kit
- CAS号:
WS4210W
- 保质期:
3个月
- 供应商:
上海瓦兰生物
- 保存条件:
4℃
- 规格:
96T/48T
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥860.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥580.0 |
本试剂盒仅供科研使用
植物根系活力试剂盒说明书
(货号:WS4210W 微板法 96 样)
一、产品简介:
植物根系的测定,传统方法是用氯化三苯基四氮唑(TTC)作为脱氢酶的氢受体,但生
成的有色物质甲臜是不溶于水以至操作麻烦,且灵敏度低;本试剂盒提供一种简单,灵敏,
快速的测定方法,利用改性的氮四唑盐作为氢受体,其生成的有色甲臜物质易溶于水,于
460nm 测定其吸光值,即得脱氢酶活性。
二、试剂盒组分与配制:
试剂名称
规格
保存要求
试剂一
液体 1.1mL×2 支
4℃保存
试剂二
液体 34mL×1 瓶
4℃保存
三、所需的仪器和用品:
酶标仪、96 孔板、天平、恒温培养箱或水浴锅、可调式移液器、离心机。
四、植物根系活力测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验样
本和试剂浪费!
1、样本制备:
先用蒸馏水把根系(尤其是带泥巴的根系)冲洗干净,再用吸水纸吸干水分,称约
0.03g 根系组织,可预先用剪刀剪成小段,放入 EP 管后按照加样表操作(确保根系样
本完全被试剂浸没)。
2、上机检测:
① 酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 460nm。
② 在 EP 管中依次加入:
试剂名称(
μL)
测定管
空白管(仅做一次)
样本(
g)
0.03g
试剂一
20
20
试剂二
340
340
充分混匀,37℃避光培养 3h,立即于室温(25℃)
10000rpm,离心 10min,取出 200μL 上清液至 96 孔板
中,于 460nm 处读取吸光值 A,△A=A 测定-A 空白。
【注】1.随着反应的进行,液体会呈现黄色现象,酶活性越大,颜色越深。
2.若△A 差值在零附近徘徊,可以加大样本取样量(如增至 0.08g),或延长避光培养时
间(如增至 6 h 或更长),则改变后的样本 W 和反应时间 T 需代入计算公式重新计算。
五、结果计算:
1、按照样本质量计算:
酶活单位定义:在 37℃时,每克样本每小时催化产生 1μg 甲臜物质为一个酶活单位。
根系活力(
μg/h/g 鲜重)=(△A÷ε÷d×V×106×Mr)÷W÷T=4.83×△A÷W
ε---甲臜物质的摩尔消光系数,3.1×104 L /mol/cm;
d---光径,0.5cm;
V---反应体系总体积,360μL =3.6×10-4L;
T---培养时间,3h;
W---样品质量,g;
Mr---甲臜物质的分子量,624.47;
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植物根系活力试剂盒,微板法
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