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总黄酮(TF)试剂盒

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  • ￥400
  • wksubio
  • WS8110F
  • 国内
  • 2026年01月08日
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    • 英文名：

      Total Flavonoids (TF) Kit

    • CAS号：

      WS8110F

    • 保质期：

      3个月

    • 供应商：

      上海瓦兰生物

    • 保存条件：

      4℃

    • 规格：

      48T

    本试剂盒仅供科研使用
    总黄酮（Flavonoid）试剂盒说明书
    (货号：WS8110F 分光法 48 样)
    一、产品简介：
    总黄酮，即黄酮类化合物；是植物重要的一类次生代谢产物，具有有较强的抗氧化活性，
    可捕捉活性氧自由基，降低氧化伤害，在果实中影响其色泽和风味；对植物的抗逆性和抗
    病虫害方面有重要作用。
    本试剂盒采用 NaNO 2 -Al(NO 3 ) 3 -NaOH 显色法测定黄酮总含量，即在碱性亚硝酸盐
    溶液中，黄酮类化合物与铝离子形成在 510nm 处有特征吸收峰的红色络合物，测定反应
    产物在 510nm 处的吸光值，即可计算样品中总黄酮含量。
    二、试剂盒组分与配制：
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    试剂一
    液体 4mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂二
    液体 8mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂三
    液体 26mL×1 瓶
    4℃保存
    标准品
    粉剂 mg×1 支
    4℃保存
    若重新做标曲，则用到该试剂
    三、所需仪器和用品：
    可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、粉碎仪、筛子、60%乙醇、离心机、
    蒸馏水。
    四、总黄酮测定：
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
    样本和试剂浪费！
    1、样本制备：
    称取约 0.1g 新鲜样本(若水分充足，可增加样本取样质量)；或者称取约 0.03g 烘干样
    本（将样本在 105℃下杀青 3min，然后 60℃烘干至恒重，粉碎，过 40-60 目筛，得到烘
    干样本），加入 1.5mL 的 60%乙醇（若鲜样需研磨均质），60℃振荡提取 2h（若蒸发用
    60%乙醇定容至 1.5mL）。25℃×12000rpm，离心 10min，取上清待测。
    【注】：若样本量较少，可同比例缩减样本量，如取 0.02g 干样，加入 1mL60%乙醇，60℃振荡提取
    2h。25℃×12000rpm，离心 10min，取上清，用 60%乙醇定容至 1mL 待测。
    ② 液体样本：直接检测；若浑浊，离心后取上清检测。
    2、上机检测：
    ① 分光光度计预热 30min，调节波长至 510nm，蒸馏水调零。
    ② 可先选取两个样本进行预测定，若 A 测定值超过 1.8，可对上清液或液体样本用
    60%乙醇进行稀释，确定适合本批样本的稀释倍数 D，相应的稀释倍数 D 需代入
    公式计算。
    ③ 在 EP 管中依次加入：
    试剂名称（µL）
    测定管
    空白管（只做一次）
    样本
    200
    蒸馏水
    200
    试剂一
    60
    60
    混匀，25℃静置 6min
    试剂二
    120
    120本试剂盒仅供科研使用
    2
    混匀，25℃后静置 6min
    试剂三
    420
    420
    混匀，25℃ 静置 15 min，液体全部转移至 1mL 玻璃比
    色皿中，510nm 处测定吸光值 A。ΔA=A 测定-A 空白。
    【注】：1. 若待检测样本有强背景色（如粉色，红色等），需做一个样本自身对照：即试剂二用 120μL
    蒸馏水替换，其他步骤同测定管，△A=A 测定-A 对照。
    2. 若△A 在零附近，可通过增加样本取样质量 W，则改变后的 W 代入公式计算。
    五、结果计算：
    1、标准曲线方程：y =2.5386x-0.0001，x 是标准品浓度（mg/mL），y 是ΔA。
    2、总黄酮含量(mg/g 干重)=[(ΔA+0.0001)÷2.5386×V1]÷(V1÷V×W)×D
    = 0.4×(ΔA+0.0001)÷W×V×D
    V---提取液体积，1.5mL；
    V1---反应中样品体积，200µL=0.2ml；
    W---样品质量，g；
    D---稀释倍数，未稀释即为 1。
    附：标准曲线制作过程：
    1 制备标准品母液（
    1mg/mL）：称取 2mg 标准品至一新 EP 管，再加 2mL 的 60%乙醇
    提取液混匀溶解，即 1mg/mL 标准品，备用。
    2 把母液用 60%乙醇稀释成五个浓度梯度的标准品：0, 0.2, 0.4, 0.6,0.8,1 mg/mL。也可
    根据实际样本来调整标准品浓度。
    3 依据测定管的加样体系操作，根据结果即可制作标准曲线。

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