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- 英文名:
NK-92
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大量
- 供应商:
北京百奥创新科技有限公司
- 物种来源:
natural killer cell; IL-2 dependent, cytotoxic to a wide range ofmalignant cells
- 是否是肿瘤细胞:
是
产品名称:ATCC NK-92细胞
产品货号: CRL-2407
Species: human
Source/Application: natural killer cell; IL-2 dependent, cytotoxic to a wide range ofmalignant cells
Morphology: lymphoblast
Growth Mode: clusters in suspension
培养基检查
定期仔细观察培养物的形态和活力。检查容器中的介质是否存在微生物污染的宏观证据。这包括不寻常的pH值变化(由酚红变为黄色或紫色)、浊度或颗粒。此外,寻找漂浮在介质-空气界面的小真菌菌落。具体检查血管边缘周围,因为这些边缘可能不容易通过显微镜看到。
用低倍镜(40×)的倒置显微镜检查培养基是否有微生物污染和细胞形态的证据。细菌污染会在细胞之间的空间内表现为微小的、闪闪发光的黑点。酵母污染会表现为圆形或出芽的颗粒,而真菌会有细丝状菌丝。对于在烧瓶中生长的非粘附细胞,如杂交瘤,这是直接在显微镜上观察烧瓶的简单问题。对于在旋转瓶或生物反应器中生长的细胞,需要提取细胞悬浮液样本,并将其装载到显微镜载玻片或血细胞仪中进行观察。
Examination of cultures
Observe the morphology and viability of cultures regularly and carefully. Examine the medium in the vessel for macroscopic evidence of microbial contamination. This includes unusual pH shifts (yellow or purple color from the phenol red), turbidity, or particles. Also, look for small fungal colonies that float at the medium-air interface. Specifically check around the edges of the vessel as these may not be readily visible through the microscope.
With an inverted microscope at low power (40×), check the medium for evidence of microbial contamination and the morphology of the cells. Bacterial contamination will appear as small, shimmering black dots within the spaces between the cells. Yeast contamination will appear as rounded or budding particles, while fungi will have thin filamentous mycelia. For nonadherent cells grown in flasks, such as hybridomas, this is a simple matter of viewing the flask directly on the microscope. For cells grown in spinner flasks or bioreactors, a sample of the cell suspension will need to be withdrawn and loaded into a microscope slide or hemocytometer for observation.


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文献和实验在NK-92细胞培养中,血清的选择和处理方式会影响培养基的配制。查看配方时,你可能会发现一个细节:马血清标注需要热灭活,而胎牛血清通常按配方要求直接加入。同样是血清,为什么操作不同?关键在于两者的来源、补体活性,以及配方对细胞培养条件的要求。下面将依次说明这一区别、马血清热灭活的原因、胎牛血清的处理方式,以及容易混淆的操作要点。实际配制时,应同时核对细胞株培养说明、培养基配方和所用血清的产品说明。
NK-92为人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞,属于IL-2依赖型NK细胞系。是NK细胞功能研究、CAR-NK工程化改造及免疫治疗机制探索的常用悬浮模式细胞,细胞聚团生长,边缘清晰、折光性强。细胞增殖依赖重组IL-2,缺少IL-2的细胞会在72 h内死亡。本文将针对NK-92的细胞培养流程进行梳理和指导。 一、细胞复苏 1.【准备工作】水浴锅提前预热至37℃;9mL完全培养基37℃预热;生物安全柜紫外照射灭菌30min; 2.【融化】液氮取出冻存管,37℃水浴快速摇晃融化,约1-2
NK细胞又称为自然杀伤细胞,属于大颗粒淋巴细胞,来源于骨髓,占外周血淋巴细胞的5%~15%,是重要的免疫细胞。科学家在1975年首次鉴定到了NK细胞,这类细胞能够在缺少T、B细胞的情况下直接杀伤肿瘤细胞。与具有细胞毒性的CD8+T细胞不同,NK细胞杀伤肿瘤细胞时不需要预先致敏可以直接杀伤MHC阴性的肿瘤细胞,这使得NK细胞在过继细胞免疫治疗中被广泛应用。但NK细胞在外周血淋巴细胞中所占的比例较低,所以有必要建立一种NK细胞体外扩增技术,用于研究NK细胞的功能并为肿瘤的细胞免疫治疗奠定
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