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- 2025年08月21日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Erysipelothrix rhusiopathiae PCR Kit
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50次
英文名称：Erysipelothrix rhusiopathiae PCR Kit
猪丹毒病是由猪丹毒丝菌 (Erysipelothrix Rhusiopathiae) 引起的一种 急性、热性人畜共患传染病, 属于农业部公布的二类动物疫病。该病广泛存在 于世界各地, 主要发生于猪, 最易侵害母猪和架子猪, 发病初期多为急性败血 型或亚急性的疹块型, 随后转为慢性型, 患猪多发生关节炎、心内膜炎。猪丹 毒病多呈散发或者地方流行, 一年四季均可发生, 但炎热多雨季节及气候温和 的季节(5~9 月) 多发, 近年也见有冬春暴发流行。因此快速检测具有重要意义。 本产品就是根据 PCR 原理开发的专门检测猪丹毒丝菌的试剂盒。
产品特点：
1. 即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板。
2. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
3. 产品精心优化且特异性高，引物是根据红斑丹毒丝菌（猪丹毒杆菌）DNA 高度保守区设计，不会跟除此之外的其它微生物 DNA 发生交叉反应。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的 PCR 反应。
6. 本产品只能用于定性实验，不能用于定量。
7. 本产品只能用于科研。
红斑丹毒丝菌（猪丹毒杆菌）PCR试剂盒包装规格及成分：
| 编号 |
成分 |
规格 |
| 试剂一 |
PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（红盖） |
| 试剂二 |
超纯水 | 1 mL（亮黄色） |
| 试剂三 |
红斑丹毒丝菌（猪丹毒杆菌） PCR 引物混合液 | 100 μL（白盖） |
| 试剂四 |
红斑丹毒丝菌（猪丹毒杆菌） PCR 阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL） | 50 μL（黄盖） |
| 试剂五 |
使用手册 | 1 份 |
运输及保存：低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。
自备试剂：DNA 模板
使用方法：
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求 的样品起始量）中加 10μL 红斑丹毒丝菌（猪丹毒杆菌） PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液 而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰 上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
| 成分 | N+2 个 样品管 | PCR 阴性 对照 | PCR 阳性 对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 红斑丹毒丝菌（猪丹毒杆菌） PCR 引物 混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
| PCR 阴性对照（水） | 18 μL | ||
| PCR 阳性对照（红斑丹毒丝菌（猪丹毒杆菌） PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液） | 18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应：
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR 反应 （35 个循环） | 95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 30 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 7 min |
三、电泳检测 5. 取 10-20 μL PCR 产物。1%琼脂糖凝胶电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。阳性对照必须有预期条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排 除 PCR 抑制剂的感染。
红斑丹毒丝菌（猪丹毒杆菌）PCR试剂盒相关产品：
| 产品名称 |
方法 |
产品规格 |
价格 |
| 红斑丹毒丝菌（猪丹毒杆菌）LAMP试剂盒 | LAMP |
50次 |
2490 |
| 红斑丹毒丝菌（猪丹毒杆菌）PCR试剂盒 | PCR |
50次 |
1990 |
| 红斑丹毒丝菌（猪丹毒杆菌）染料法荧光定量PCR试剂盒 | 染料法 |
50次 |
2490 |
| 红斑丹毒丝菌（猪丹毒杆菌）探针法荧光定量PCR试剂盒 | 探针法 |
50次 |
2990 |
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文献和实验菌在血平板上的菌落形态与草绿色链球菌很相像，但镜下形态差别很大。图6所示为红斑丹毒丝菌的革兰染色镜下形态[4]。 2.3 鉴定方向及试剂选择的依据 葡萄球菌和链球菌、革兰阳性球菌和革兰阳性杆菌、革兰阴性球菌和革兰阴性杆菌的鉴定方向均不同，鉴定试剂选择也不同。 2.4 药敏组合选择的依据 CLSI文件规定，每一种细菌都有一定的抗菌药物组合供选择。要准确进行药敏组合选择，就必须有准确的细胞形态学结果作支持。
Enterococcus saccharolyticus 解糖肠球菌 Erwinia spp 欧文菌属某些种 Erysipelothrix rhusiopathiae 猪红斑丹毒丝菌 Escherichia coli 大肠埃希菌 Escherichia fergusonii 费格森埃希菌 Escherichia hermannii 赫氏埃希菌 Escherichia vulneris 伤口埃希菌 Eubacterium aerofaciens 产气真杆菌 Eubacterium
，或药敏结果对治疗很重要时才做药敏试验。因此，准确鉴定病原菌直接影响到临床选药和治疗。多杀巴斯德菌属及侵蚀艾肯菌（常见于动物咬伤感染）常规用药为阿莫西林/棒酸。棒状杆菌属、JK棒状杆菌、解尿棒状杆菌通常对β-内酰胺类、大环内酯类、氨基糖苷类耐药。红斑丹毒丝菌和多数乳杆菌属对万古霉素天然耐药；产单核李斯特菌对头孢菌素类天然耐药；明串珠菌属、片球菌属对万古霉素天然耐药但对β-内酰胺类、氯霉素和氨基糖苷类敏感。卡他莫拉菌产β-内酰胺酶，对青霉素和氨苄西林耐药，但很少对大环内脂类耐药。在经验性治疗时应避免使用
