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内皮细胞培养实验服务

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  • 内皮细胞培养实验服务
  • 浙江省
  • 2025年12月08日
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      嘉兴硕玺生物有限公司

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      内皮细胞培养实验服务

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    实验操作流程:
    (培养人脐静脉内皮细胞为例)
    1、新生儿脐带:在无菌条件下,于健康产妇分娩后立即取新生胎儿脐带。长度>20 cm,两端扎紧投入到 4℃脐带保存液中,1 h内送细胞培养室。
    2、剪去脐带两端和脐带上有夹痕及血肿部分,尽量挤干净脐带内血液。
    3、用生理盐水冲洗脐带表面至无血色。
    4、用输血器内接有穿刺器的软管,找到脐静脉,将软管针头一端插入脐静脉,用止水夹固定,另一端接 20 m1注射器,吸取PBS反复冲洗脐静脉直至无血色液体流出为止;将脐带另一端用止血钳夹闭,向脐静 脉中灌入01 I型胶原酶溶液,使之充盈,夹闭软管
    537℃水浴中孵育20 min,其间轻轻挤压并旋转脐带,以使酶溶液充分接触血管内壁
    6 将细胞一酶溶液收集于预先装有温培养液小三角瓶中。用2倍于消化液的温PBS冲洗脐静脉,一并收集 于小三角瓶中,将细胞悬液装入10 ml离心管,1 000 rmin离心10 min,弃上清,吹打悬浮,再次离心10 min,重悬细胞并接种于铺有明胶的25 cm2培养瓶中,置于37℃ 5 C02饱和湿度培养箱中培养,24 h 更换培养液,以后每隔2 d换液1次。
    7、脐静脉内皮细胞的传代培养:当原代细胞融合80%以上后,加入 005 胰蛋白酶一002EDTA 液消化,倒置显微镜下观察,当细胞皱缩变圆、彼此分离时弃消化液,加入细胞培养液终止消化,收集细 胞悬液。1 000 rmin离心10 min,弃上清,制成单细胞悬液。此时可用05%台盼蓝染色,计算活细胞 百分率,并以血细胞计数板计数。调整细胞浓度为1×10 个/ml,接种于培养瓶或培养板中继续培养。待 细胞长满,彼此融合成片时依上述方法继续传代培养。
    实验注意事项:
    客户提供:
    细胞建模的药品或试剂,细胞(可由硕玺代购)
    交付标准:
    1、细胞
    2、完整项目报告(材料、试剂、仪器、方法、数据分析、实验结果)

     
    产品细节图片3
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