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- 2025年08月18日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Coxsackie Virus(CVA6)
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50次
英文名称：Coxsackie Virus(CVA6)
本产品是基于荧光定量PCR原理开发，专门检测柯萨奇病毒CVA6型 变种的试剂盒。
产品特点：
1. 一站式，用户不需要单独准备每种成分，包括引物和对照。
2. 根据柯萨奇病毒CVA6型变种的保守基因序列设计的引物，具有良好的特异性。
3. 灵敏度可以达到 1000 拷贝/反应。
4. 使用一管式 RT-PCR 技术，RT 和 PCR 两步在一个试管内完成，不需要中间 转移样品，降低了操作误差和可能的污染。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的 RT-PCR。
6. 本产品只能用于科研，不能用于临床。
柯萨奇病毒CVA6型变种RT-PCR试剂盒包装规格及成分：
| 编号 |
成分 |
规格 |
| 试剂一 |
5×双酶一管式 RT-PCR Buffer | 200 μL（橘黄 盖） |
| 试剂二 |
MMLV-Taq Mix | 75 μL（红盖） |
| 试剂三 |
超纯水 | 1 mL（亮黄盖） |
| 试剂四 |
柯萨奇病毒CVA6型变种RT-PCR 引物混合液 | 100 μL（白盖） |
| 试剂五 |
柯萨奇病毒CVA6型变种RT-PCR 阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL） | 50 μL（黄盖） |
| 说明书 | 使用手册 | 1 份 |
注：为避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供专一的 DNA 片段作为阳性对照。
运输及保存：低温运输，-20℃保存，保存期限为 12 个月。收到货后阳性对照需要跟其他成分 分开放置，因为其容易污染其他成分，造成假阳性。
自备试剂：样品 RNA
使用方法：
一、样品 RNA 的制备
1. 如果有 N 个样品，必须设置 N+2 个提取，多出的一个是 PC（样品制备阳性 对照），一个是 NC（样品制备阴性对照）。可以用 10μL 柯萨奇病毒CVA6型变种PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液作为制备的阳性对照。可以用水作为制备的阴性对 照。制备所得成为样品 RNA。
2. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 RNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 RNA 提 取试剂盒兼容。可以选购本公司的柱式病毒 RNAout。
二、设置 RT-PCR 反应（20μL 体系）
3. 如果有 N+2 个样品，则标记 N+4 个 PCR 管（额外增加的两个管一个是 RT-PCR 阳性对照，另一个是 RT-PCR 阴性对照）并按照下表在 PCR 管中 加入下列成分：
| 成分 | N+2 个 样品管 | RT-PCR 阴性对照 | RT-PCR 阳性对照 |
| 5×双酶一管式 RT-PCR Buffer | 各 4 μL | 4 μL | 4 μL |
| 柯萨奇病毒CVA6型变种RT-PCR 引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个制备的 RNA 样品 | 各 12.5 μL | ||
| 超纯水 | 12.5 μL | ||
| 柯萨奇病毒CVA6型变种RT-PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液 | 12.5 μL | ||
| MMLV-Taq Mix | 1.5 μL | 1.5 μL | 1.5 μL |
4. 上机进行 RT-PCR，RT-PCR 反应参数为:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| 逆转录 | 42℃ | 30 min |
| PCR 反应 （35 个循环） | 95℃ | 30 sec |
| 58℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 20 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 7 min |
5. 琼脂糖电泳检测扩增效果。如果阴性对照有扩增产物或阳性对照无扩增产物， 则说明实验失败，需要分析实验失败的原因。只有在阴性对照没有扩增产物、 阳性对照必须有 135bp 的条带出现，才有必要分析样品的实验结果，如果有 预期片段大小的扩增产物则为阳性，如果无则为阴性。
柯萨奇病毒CVA6型变种RT-PCR试剂盒相关产品：
| 产品名称 |
方法 |
产品规格 |
价格 |
| 柯萨奇病毒CVA6型变种RT-LAMP试剂盒 | LAMP |
50次 |
2990 |
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50次 |
2490 |
| 柯萨奇病毒CVA6型变种染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 染料法 |
50次 |
2990 |
| 柯萨奇病毒CVA6型变种探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 探针法 |
50次 |
3490 |
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文献和实验扩增.可用于同时检测多种病原体或鉴定出是那一型病原体感染，可组合系统的有: ①肝炎病毒的感染，在同一病人或同一供血者体内，有时存在多种肝炎病毒重叠感染，有时是甲乙丙型肝炎病毒重叠;有时可能是甲乙型肝炎病毒重叠;有时是乙丙型肝炎病毒重叠. ②肠道致病性细菌的检测，如伤寒，痢疾和霍乱，有时具有较相同的肠道症状，有时痢疾霍乱同存一病人并同时发病. ③性病的检测，如梅毒，淋病及艾滋病的诊断. ④战伤细菌及生物战剂细菌的检测
，其中规定了确诊病例的诊断方法：具有急性发烧呼吸道疾病的临床症状并且经实时荧光定量PCR （real-time RT-PCR）或病毒分离培养 （viral culture）实验室检测方法检验证实感染A（H1N1）型猪流感病毒。卫生部办公厅于4月30日印发了《人感染猪流感预防控制技术指南（试行）》的通知》[7],其中在实验室检测和病例诊断报告章节，内容如下：检测程序呼吸道标本应首先应用real time RT-PCR方法检测A型流感病毒的M基因、Swine（ H1N1）的HA基因和NP基因，以及质控对照
亚型多重核酸荧光PCR试剂盒，为检验检疫部门和疾控部门等疫情防治提供有力的技术支持。 【产品简介】 本产品选择EBOV病毒核蛋白（NP）基因的高度保守的序列设计引物和Taqman探针。应用一步法RT-PCR，在一个封闭反应管中将RNA合成cDNA，再以此为模板扩增合成目的片段。PCR扩增中与模板cDNA互补配对的Taqman探针被水解切断，荧光素游离于反应体系中，在特定光激发下发出荧光，表现出荧光信号的累积与PCR产物形成同步，从而实现EBOV病毒的快速检测与分型。 【产品优势
